探针制备_《临床生物化学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...标记核苷酸同时进行,切口平行推移,可均一标记DNA链。(图18-4、5)缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性较高、标记均一。主要利用了DNA聚合酶Ⅰ修复DNA的功能,用于大分子DNA标记(>1000bp最好),单链DNA、RNA不能...

http://qihuangzhishu.com/1001/318.htm

DNA聚合酶_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...,也不能单链DNA作为模板。2.噬菌体DNA聚合酶这里以T4DNA聚合酶为例。它也具有5’→3聚合酶活性,但它的外切酶活性比大肠杆菌的要高200倍。因此,它也可用来补齐单链末端或标记同位素。...

http://qihuangzhishu.com/969/619.htm

寡核苷酸探针的制备_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

...因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应,而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应最多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子。2)大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段标记合成的寡核苷酸探针,其比活性更高,...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-22-5.html

参考文献_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...):1~419.吉昌华.应用特异性双引物法标记DNA探针.第四军医大学学报,1991;12(1):6620.吉昌华.应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针.第四军医大学学报,1990;11(4):31621. WangBo –yun(王伯沄)...

http://qihuangzhishu.com/969/532.htm

参考文献_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

...):1~419.吉昌华.应用特异性双引物法标记DNA探针.第四军医大学学报,1991;12(1):6620.吉昌华.应用聚合酶链反应标记高活性DNA探针.第四军医大学学报,1990;11(4):31621. WangBo –yun(王伯沄)...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-22-6.html

寡核苷酸探针的制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...因而易用T4噬菌体多核苷酸激酶进行磷酸化反应,而将α-32P从[γ-32P]ATP转移至其5’端。这种磷酸化反应最多能使每一寡核苷酸分子中掺入一个32P原子。2)大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段标记合成的寡核苷酸探针,其比活性更高,...

http://qihuangzhishu.com/969/531.htm

DNA聚合酶_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...Klenow片段完成β-珠蛋白的PCR后,世界上许多实验室就考虑耐热DNA聚合酶代替Klenow片段进行PCR,使耐热多聚酶的研究得以迅速发展。人们从生活于60℃(B.Stearothermophilus)到87℃(S.Solfatavicus)的...

http://qihuangzhishu.com/969/584.htm

DNA探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...包含基因组的全信息的克隆库。然后多种其它菌种的DNA探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段。将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能。...

http://qihuangzhishu.com/969/486.htm

关于探针标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...(一)cRNA探针的同位素标记1.标记液(转录标记)2.转录缓冲液※:用地高辛或生物素标记时,UTP替代。3.标记终止液4.标记探针水解液先用dH2O悬浮探针,再加入后两种试剂,轻轻振摇混合,于60℃条件下反应。5.探针水解时间注:LO...

http://qihuangzhishu.com/969/666.htm

非放射性标记的核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中,制成标记探针,敏感度高于化学修饰法,但操作程序复杂,产量低,成本高。化学修饰法是将不同标记物化学方法连接到DNA分子上,方法简单,成本低,适用于大量制备(>50μ...

http://qihuangzhishu.com/969/518.htm

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