由于酶标抗体存在一些缺点，例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性；②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后，与组织成分结合，可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上，发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法（Enzyme Bridge Method）和过氧化物酶抗过氧化物酶法（PeroxidaseAntiperoxidase Method,...
...碱基配对规则的一种结合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测，必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记，这条链就称为核酸探针。因此，核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法是放射性同位素标记。常用的放射性同位素有32P和35S前者能量高，信号强，最常用。放射性同位素标记探针虽然敏...
用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种，请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 （1）角蛋白（Keratin） 上皮与肌上皮细胞 （2）波纹蛋（Vimentin） 间叶分化细胞、内皮细胞 （3）结蛋白（Desmin） 肌组织分化细胞 （4）肌动蛋白（Actin） 肌细胞，肌上皮细胞，肌纤维 （5）肌浆球蛋白（M...
例如抗IgA血清的纯化方法---免疫吸收法。如分泌型IgA（SIgA）抗原纯度不高，所制的抗血清常与IgG呈交叉反应，为此需要吸收，常采用纯化的人IgG戊二醛聚合物加以吸收纯化。方法如下： 1．人IgG聚合物的制备在5ml含40mg/ml人IgG的0.1mol/l pH7.0磷酸缓冲溶液中，加入2.5%戊二醛溶液1ml，边加边搅，5min即出现混浊，逐现大块...
（一）抗原及其用量的选择 由于Ab2是针对Ab2Id的抗体，因而制备Ab2时应选择适当的Ab1作为免疫原。所用抗原的用量依照给予抗原的种类、次数、途径以受体动物的耐受性而有所不同。一般来说，当受体动物为小鼠时，常用Ab1最为50-200μg；若受体动物为家兔时，使用的Ab1量可达100-200μg。 （二）免疫动物的选择 抗独特型抗体可在自身体内、同类系、同...
根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别，抗原抗体反应表现为不同的形式。颗粒性抗原表现为凝集反应；可溶性抗原表现为沉淀反应；补体参与下细菌抗原表现为溶菌反应，红细胞抗原表现为溶血反应；毒素抗原表现为中和反应等。利用这些类型的抗原抗体反应建立了各种免疫学技术，在医学检验中广泛用于抗原和抗体的检测。为了提高反应的敏感性和特异性，便发展了一些新的试验类型，如种种标...
取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18...
（一）特异性 抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原与抗体的结合具有高度的特异性。这种特异性如同钥匙和锁的关系。例如 白喉 抗毒素只能与相应的外毒素结合，而不能与 破伤风 外毒素结合。但较大分子的蛋白质常含有多种抗原表位。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位，或抗原、抗体间构型...
根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别，抗原抗体反应表现为不同的形式。颗粒性抗原表现为凝集反应；可溶性抗原表现为沉淀反应；补体参与下细菌抗原表现为溶菌反应，红细胞抗原表现为溶血反应；毒素抗原表现为中和反应等。利用这些类型的抗原抗体反应建立了各种免疫学技术，在医学检验中广泛用于抗原和抗体的检测。为了提高反应的敏感性和特异性，便发展了一些新的试验类型，如种种标...
Kbaffan等（1986）首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术，可进行双标记或多标记。 （1）取7-氨基-4-甲基香豆素（7-amino-4-methyl coumarin, AMC）260μg溶于二甲亚砜25μl中。 （2）将上液加入10ml IgG的 巴比妥缓冲液（0.5mol/L,pH8.5,内含50～100mg IgG）中，室温反应2h，过Sepha...
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