...基因转移的方式和机理有几种不同形式。两个细菌细胞间可通过暂时的沟通(如接合);也可根本不接触,通过供体菌释放的DNA片段进入受体菌(如转化);也可通过噬菌体作媒介将供体菌的DNA片段包裹在其头部转移至受体菌(转导)。一、转化转化是受体菌直接...
...日前,美国加州大学的研究人员发现通过一种噬菌体可能找到高效开发抗HIV和其它病毒药物的新途径。该研究的结果公布在新出版的《美国化学会志》上。 为了更好地找到能够阻止病毒突变和扩增的化合物,该大学的Gregory Weiss教授和...
...(一)载体载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记...
...重组的噬菌体DNA也可象质粒DNA的方式进入宿主菌,即宿主菌先经过CaCl2,电穿孔等处理成感受态细菌再接受DNA,进入感受态细菌的噬菌体DNA可以同样复制和繁殖,这种方式称为转染(transfection)。M13噬菌体DNA导入...
...第四军医大学西京医院消化病研究所日前用噬菌体环7肽库成功筛选到能特异性结合胃癌耐药细胞株的短肽,为肿瘤治疗或药物靶向治疗奠定了基础。 胃癌化疗失败的主要原因之一是肿瘤在化疗中出现多药耐药现象。胃癌细胞在化疗药物长期持续作用下,不仅膜表面...
...以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。通常所用的质粒载体有pBR322...
...片段的位置,进而排出DNA的全序列。三、双脱氧链终止法测定方法以M13噬菌体为载体的双氧链终止法的实施步骤为例:1.M13噬菌体复制型双链DNA(RFDNA)的制备。为了将待测双链DNA进行克隆,必须制备M13mp18或M13 mp19复制...
...片段的位置,进而排出DNA的全序列。三、双脱氧链终止法测定方法以M13噬菌体为载体的双氧链终止法的实施步骤为例:1.M13噬菌体复制型双链DNA(RFDNA)的制备。为了将待测双链DNA进行克隆,必须制备M13mp18或M13 mp19复制...
...test)后才初步获得解决。变异试验是根据统计学原理设计的(图5-1)。将一瓶对大肠杆菌噬菌体T1敏感的细菌培养后,稀释至1,000细菌/ml,分别分至两套试管系列。一套仅将细菌接种至一支大管培养基中,经一段时间培养后,分别接种于数个平板。在...
...以质粒或噬菌体作载体进行DNA克隆,在理论上是很简捷的,即用一种限制酶切割质粒DNA,然后在体外与外源,DNA(如干扰素基因,生长激素基因)相连接,再用所得到的重组质粒转化细菌如大肠杆菌,以鉴定重组DNA。通常所用的质粒载体有pBR322...
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