原位杂交技术 (In situ hybridization,ISH)是 分子 生物学 、 组织化学 及 细胞学 相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾 核糖体 基因探针 与其 卵母细胞 杂交,将该 基因 进行定位,与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利...
荧光原位杂交 方法是一种 物理图谱 绘制方法,使用 荧光素 标记 探针 ,以检测探针和分裂中期的 染色体 或 分裂间期 的 染色质 的杂交。 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世纪80年代末在 放射性 原位杂交技术 的基础上发展起来的一种非放射性 分子 细胞遗传技术,以 荧光标记 取代 同...
是将 细菌 从培养平板转移到 硝酸 纤维素滤膜上,然后将滤膜上的 菌落 裂菌以释出DNA。将NDA烘干固定于膜上与32P标记的 探针 杂交, 放射自显影 检测菌落杂交信号,并与平板上的菌落对位。
组织化学 (histochemistry)和 细胞化学 (cytochemistry)技术是通过 化学 或 物理 反应原理显示 组织切片 细胞内某种化学成分,进行定位、定量及其与功能相关的研究。如糖类、 脂类 、酶、 核酸 等与 试剂 发生化学物理反应,形成有色终末产物,在光镜下观察,有的可在电镜下观察。 1.糖类显示 多糖 和 蛋白 多糖的常用方法是 过碘...
一、DNA探针的应用
原位杂交术(in situ hybridization)是一种核酸分子杂交技术,它是通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段,原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基 图1-11 大 鼠肝 大部切除后再生过程中增殖期肝细胞 摄取 3 H标记的胸腺嘧啶核苷放射自显影像 ↑ 增殖期肝细胞核 因表达。其基本原理是根据两条单链核苷酸互补碱基序列专一配对的特点,应用已知碱基...
...所周知,肝脏是一个代谢很活跃的器官,每个肝细胞含有数千个线粒体(约1000-2000个),线粒体含有极为丰富的酶类,估计有70多种酶;近代酶组织化学能从形态学显示的有30多种。 酶的组织化学与酶的生化学不同之处在于,酶的组织化学是在保存组织和细胞完整的生活状态下,通过底物的一系列反应呈颜色反应;而酶的生化学反应大都是将组织(或细胞)捣碎制成匀浆(或血清),通...
原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数小时内完成。 作用把含某种多肽或蛋白的cDNA片段的质粒,按照第十九章 在光照下标记光敏生物素,然后经DNA酶消化1h,得到...
中华骨科杂志 2000年第0期第20卷 骨肿瘤 作者:丘钜世李扬王连唐 单位:中山医科大学病理教研室广州,510080 肿瘤的抗原性与肿瘤的组织来源及组织分化有密切的联系 。原发性骨肿瘤多来源于间胚叶组织,有着共同的抗原决定簇 ,如中间丝蛋白Vimentin,可籍与其它组织(上皮组织、神经组织 、肌肉组织等)来源的肿瘤相区别。但随着肿瘤组织分化表型 的不同,...
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