...,并显示真正的膜表面。冷冻断裂和冷冻蚀刻技术能从亚分子水平上重建膜的立体结构。 在电镜下,冷冻断裂的细胞膜显示二个互补的断面,即内面(a面)和另一互补的断面(b面)。在断面上,可见在平滑的背景面上,有一些直径为4-16nm,无一定方向排列的...
...关于免疫金银细胞化学的原理、试剂配制和光镜显示技术在本书第五章 已作了较详尽的叙述。免疫金银细胞化学技术说可应用于电镜水平。一般用于包埋前染色。其主要操作步骤如下:(1)组织固定振动切片机切片10~30μm。(2)人3%正常羊血清,含...
...应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用3H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,...
...应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原标记,如需穿透细胞膜,则需辅以冻融法或加入Triton X—100、皂素等活性剂,后者会加重细胞超威结构的破坏,因此,现较普遍...
...(一)基本原理在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行...
...观察,称为酶免疫电镜技术。酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相(homogenous)和异相(heterogenous)两种类型,实际上所有的标记免疫测定均可分成这两类。如以标记抗体检测标本中的抗原为例,...
...方法 (三)扫描免疫电镜的具体操作步骤 三、冷冻蚀刻免疫电镜技术 1.冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术 2.断裂—标记免疫电镜技术 参考文献 第八章 蛋白质与多肽激素的放射免疫分析 第一节 概述 一、放射免疫分析的优缺点 二、基本原理 第二节 ...
...二、扫描免疫电镜技术 ◦ (一)标记物 ◦ (二)免疫标记方法 ◦ (三)扫描免疫电镜的具体操作步骤 三、冷冻蚀刻免疫电镜技术 ◦ 1.冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术 ◦ 2.断裂—标记免疫电镜技术 参考文献 第八章 蛋白质与多肽激素的...
...注意浓度应适宜,过高会减弱特异性反应。(2)细胞附着于固体支持物:由于固定与免疫标记的孵育过程会引起细胞凝集,妨碍细胞表面的暴露,而且反复的离心与悬浮会导致细胞表面形态的改变。因此,通常将悬液中的细胞粘附于过滤膜或涂有带正电荷聚合物的盖玻片...
...标记抗体与抗原的结合,也可在光镜和电镜下观察(图1-7)。图1-6 大鼠腺垂体免疫组织化学(PAS法)示生长激素细胞(上海医科大赵培林教授供图)图1-7 免疫细胞化学(蛋白A-胶体金法)和原位杂交术示大鼠垂体催乳素细胞电镜像 N催乳素细胞核↑...
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