...膜的镍网沾取金标蛋白溶液，空气中干燥后醋酸铀复染，在TEM下观察，可见金颗粒周围有一明显的空晕，表示颗粒表面吸附有蛋白质分子。 （2）纯化后免疫金探针是否保持很好的生物学活性是判断其质量好坏的主要指标，因此，在使用之前必须对它的特异性，敏感性进行鉴定。鉴定举例，用阳性抗原片，脱蜡至水，胰蛋白酶消化，加第一抗体（多克隆或单克隆），一般过夜再加标记抗同一抗特异性...
1．染色特点 （1）要进行SC和IgA组织定位，必须有相应特异抗血清。SC抗血清国内没有生产。国内商品IgA抗血清的抗原多来自 人乳 中的SIgA，具有双重抗原性（SC和IgA），不能特异进行IgA组织定位，最好采用抗人α-重链抗血清。 （2）SC是糖蛋白，IgA是免疫球蛋白。在组织处理上虽然有人提出用冷冻切片或福尔马林固定胰酶消化的方法，我们的体会用冷酒精...
...酸（0.1mol/l PBS溶液）1h。 （13）双蒸水洗15min。 （14）系列酒精或丙酮 脱水 ，包埋、超薄切片。（15）枸椽酸铅对照染色。 为增加抗非特异性染色，有的实验室倾向在TBS中加入1%小 牛血 清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA, Sigma）。理想的免疫金染色切片，背景应清洁，无残留的金或其他无机盐颗粒，金粒集中...
斑点免疫渗滤试验的基本原理是：以硝酸纤维素膜为载体，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的，应用的结合物是酶标记的，称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗滤试验（dotymmunogoldfiltrationassa...
（一）免疫金的特性 胶体金可以和蛋白质等各种大分子物质结合，在免疫组织化学技术中，习惯上将胶体金结合蛋白质的复合物称为金探针。用于免疫测定时胶体金多与免疫活性物质（抗原或抗体）结合，这类胶体金结合物常称为免疫金复合物，或简称免疫金（immunogold）。 胶体金与蛋白质结合的机制尚有十分清楚，一般认为是物理吸附性的。胶体金颗粒带有一层表面阴性电荷，与蛋白质...
抗体产生细胞胞浆内含有相对多的抗原，故采用直接或间接法免疫细胞化学技术可简化步骤，节 省时间，降低成本。为了清除组织间弥散的免疫球蛋白，我们在固定前用PBS浸洗，取得良好的效果。用双标记免疫荧光技术可以在同一张切片上显示出两种不同的抗体产生细胞。 1．组织加工根据研究目的的内窥镜直视下钳取胃、小肠或结肠粘膜。将取得的组织立即放入含4 ℃ ，pH7.2、0.0...
染色试验(MBD)是诊断 弓形虫病 的可靠和敏感的方法，其在早期感染即出现阳性，并能维持1年之久，但该试验需用活的弓形虫，一般的医学检验室不易进行。补体结合试验阳性反应出现在病程后期并转阴较快，与染色试验结合使用有参考价值，皆因操作繁琐而为间接血凝、荧光抗体和酶免疫吸附测定等法所取代。一些新的测抗体的方法在国内使用尚不普遍。本文主要介绍点免疫金渗滤法。
染色试验(MBD)是诊断 弓形虫病 的可靠和敏感的方法，其在早期感染即出现阳性，并能维持1年之久，但该试验需用活的弓形虫，一般的医学检验室不易进行。补体结合试验阳性反应出现在病程后期并转阴较快，与染色试验结合使用有参考价值，皆因操作繁琐而为间接血凝、荧光抗体和酶免疫吸附测定等法所取代。一些新的测抗体的方法在国内使用尚不普遍。本文主要介绍点免疫金渗滤法。
1．组织固定和加工 用冰冻组织切片可直接进行溶菌酶免疫细胞化学研究。用冷酒精固定，4%福尔马林缓冲液或1.5%戊二醛固定均能进行免疫细胞化学染色。但浸蜡时温度不能超过60 ℃ ，载玻片应涂薄层 明胶 以防组织切片脱落。载片后，组织切片应放在50～56 ℃ 的烤箱中干燥但不能放在底层，因烤箱底层温度不均匀。组织切片应避免接触含油类的手和容器。组织块应放在4℃密...
1．组织加工 有人提出用冰冻切片进行CEA免疫细胞化学染色。由于非特异性荧光和需要一定设备条件，有人改用福尔马林固定和胰酶消化的方法。从我们的体会看，福尔马林固定后的切片CEA的部分抗原决定簇被遮盖，阳性结果显着受到影响。但是用冷酒精固定后的组织切片，CEA的阳性率明显升高，而且结果仍很清晰。goldenbery等同时进行CEA酶标记组织，而福尔马林固定的组...
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