...双层玻板内，待凝。抗血清效价高时，亦可直接将抗血清混入12.0g/L琼脂中，摇匀后制板。 2．按模式图用直径3mm的金属管打孔，6×12cm免疫扩散板打孔28个，6×8cm免疫扩散板打孔16个。 3．待测血清用硫柳汞盐水稀释（按说明书），用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒（水平位置）37℃扩散24h，测沉淀环直径，如图18-2所示。 图18-...
...养不良 时蛋白合成原料不足，这些也都可以不同程度地引起血清补体水平下降。 在患 系统性红斑狼疮 、 类风湿性关节炎 和 强直性脊柱炎 等自身免疫病时，血清补体水平随病情发生变化。疾病活动期补体活化过度，血清补体水平下降；病情稳定后补体水平又反应性增高。另外，补体各成分在不同的自身免疫病时可有特征性的表现（详见第二十五章），因此补体检测常可作为自身免疫病诊断或...
1．材料 （1）免疫血清60℃灭活20min，用Kolmers 盐水作2倍稀释成1：2，1：4，1：8……。补体用1：10稀释的新鲜豚鼠血清，抗补体荧光抗体等，按下述的补体法染色。免疫血清补体结合的效价，如为1：32则免疫血清应作1：8稀释。 （2）补体用新鲜豚鼠血清一般作1：10稀释或按补体结合反应试管法所测定的结果，按2单位的比例，用Kolmers盐水稀...
关于免疫金银细胞化学的原理、试剂配制和光镜显示技术在本书第五章 已作了较详尽的叙述。免疫金银细胞化学技术说可应用于电镜水平。一般用于包埋前染色。其主要操作步骤如下： （1）组织固定振动切片机切片10～30μm。 （2）人3%正常 羊血 清，含0.1%Triton X—100 的PBS孵育30min，以封闭非特异性结合部位 （3）1%硼氢化钠的PBS孵育30m...
在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时，要进行双重荧光染色，一般均采用直接法，将两种荧光抗体（如抗A和抗B）以适当比例混合，加在标本上孵育后，按直接法洗去未结合的荧光抗体，抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记，发黄绿色荧光；抗B抗体用TMRITC或RB200标记，发红色荧光，可以明确显示两种抗原的定位。
...后，关闭电源，置凝胶板于10.0%三氯醋酸液固定15～20min，取出胶板，在黑色背景灯光下量取沉淀峰高度，如图18-3所示。 图18-3 免疫火箭琼脂糖电泳图 7．计算 （1）查标准曲线。 （2）按下式计算： 8．如果需要也可将凝胶板置0.9% NaCl液漂洗过夜更换蒸馏水漂洗，底板衬以硬薄膜，尔后置染色液染色，脱色后可见明显的沉淀峰，干燥，以便长期保存。
用各种方法提纯单一成分的抗原是产生单价特异性抗体的最主要条件。近代免疫化学技术（免疫吸收法）和柱层析法等提供了很大的可能性，可参考有关专着。
1．直接检查组织内免疫复合物法用抗补体C3等荧光抗体直接作用组织切片，与其中结合在抗原抗体复合物上的补体反应，而形成抗原抗体补体复合物---抗补体荧光抗体复合物，在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物的存在处，此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。 图3-4 补体法 2．间接检查组织内抗原法常将新鲜补体与第一抗体混合同时加在抗原标本切片上，经37℃孵育后，...
（1）切片固定后用毛细滴管吸取经适当稀释的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的湿度，37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗两次，10min，用吸水吸去或吹干余留的液体。 （2）再滴加间接荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体等），同上步骤，染色30min，37℃，缓冲盐水洗两次10min，搅拌，缓冲甘油封固，镜检。 对照染色：...
...双层玻板内，待凝。抗血清效价高时，亦可直接将抗血清混入12.0g/L琼脂中，摇匀后制板。 2．按模式图用直径3mm的金属管打孔，6×12cm免疫扩散板打孔28个，6×8cm免疫扩散板打孔16个。 3．待测血清用硫柳汞盐水稀释（按说明书），用微量加样器每份标本加1孔。加样量10μl。置湿盒（水平位置）37℃扩散24h，测沉淀环直径，如图18-2所示。 图18-...
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