...探针。标记方法步骤：（1）取一小离心管（0.5ml）插入冰浴中，加入待标记DNa 1μg/5μl，95℃变性10min，迅速移入盐冰中3min。加入六核苷酸引物2μl，Dig-dNTP标记物2μl和消毒双蒸水10μl、大肠杆菌DNA聚合酶i ...
...盒，48℃孵育4h或过夜。次日PBS漂洗，以抗生物素标记FITC抗血清（100μg/ml PBS pH7.2）37℃孵育1h，PBS冲洗，以甘油/PBS溶液封片，荧光显微镜观察。如生物素标记核酸探针的显示系统为过氧化物酶，则应用DAB/H2...
...32P]dCTp 1.5×106Bq，dATp 、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤：（1）变性：反应管在95℃水浴5min，然后离心；（2）退火：37℃水浴2min；（3）延伸：加入DNA聚合酶i 1u，37℃水浴...
...HCl pH8.8含2.5mmol/l MgCl2、6.7mmol/L(NH4)2SO4、10mmol/l β-巯基乙醇、170mg/l BSA、6.7μmol/l EDTA和40μl/ml二甲亚砜。将反应管置于95℃水浴变性5min取出，...
...标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如32P标记DNA探针（缺口平移法）：反应体积为25μl，内含0.3μgDNA片段，4μl 0.2μmol/L dNTP, 1.1×106Bq [α-32P]dATP,1μl2万倍稀释的...
...、抗H-2A及抗H-4，以抗H-2B和抗H-1为主，并与SLE的活动性有关。（二）ANA的检测方法由于ANA的复杂性及多样性，故测定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等...
...作为包埋剂的（详见第七章 ）。（二）应用生物素标记DNA探针-PA-gold电镜杂交技术（Binder et al,1986）1．固定现认为应用4%多聚甲醛加0.1%戊二醛在磷酸缓冲液中（pH7.4），为较理想的固定剂，也有主张单纯用4%...
...连接在DNA上以后，再进行AP酶显色。这里SA为Streptavidin（链酶亲合素），BAP为生物素化的磷酸酶，B为生物素（biotin），ABC为Avidin – Biotin - Enzyme com－plex, 即亲合素- 生物素-...
...聚合酶链反应（PCR）或称体外基因倍增技术，它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物，在DNA聚合酶的介导下，经过多次变性，退火和延伸过程的重复性循环，大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时，经PCR反应产生的靶...
...dNTP(ACG)0.5μg/ml2μlBio –11–dUTP 0.5μg/ml2μl10×NTb 4μl消毒三蒸水 31μl混匀，短暂离心后，加入DNA聚合酶I（5u/μl）1μl总体积50μl混匀，14℃过夜（10h以上），加入终止液 ...
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