...RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的...
...随机引物标记探针方法 七、异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针 八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法 九、三硝基苯磺酸(TNBS)标记核酸探针 十、生物素化的RNA探针标记 十一、辣根过氧化物酶标记核酸探针法 ...
...加DNA聚合酶(SABC)8u,混匀,37℃,2h,加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl,终止反应。在随机引物标记体系中,加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%),发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。...
...mol/L EDTA3.探针沉淀液(三)cRNA探针非同位素标记(地高辛及生物素)1.标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)...
...-N-羟基琥珀标记化学修饰的DNA法 五、缺口平移法标记生物素DNA探针(二步法) 六、生物素随机引物标记探针方法 七、异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针 八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法 九、三硝基苯...
... EDTA,pH8.0终止显色。(22)甘油明胶直接封片。结果:杂交阳性部位着蓝黑色。组织处理及预杂交所用器皿需高温消毒,实验者需戴手套。(三)酶促生物素标记cRNA探针的应用基本方法和放射性标记cRNA探针同,所不同的是探针浓度为2.5μ...
...最常用的同位素是α-32PdNTP,3HdNTP,及35SdNTP,多用缺品平移法、末端标记法,随机引物延伸法和反转录标记法。在以mRNA制备cDNA时,同时掺入标记的脱氧核苷酸,制出cD-NA标记探针。...
...利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交...
...半衰期短、需要特别的安全防护条件等,限制了同位素标记探针的广泛应用。因此,非同位素标记探针的研制引起重视,自Langer等(1981)合成了生物素化dUTP和NTP类似物以来,开创了用非同位素标记的新领域,用生物素标记核酸探针检测和识别特定的...
...转变为光能放出,称为化学发光。杂交后与探针结合的酶催化相应的发光剂,经增强剂将光能放大,在X光片上显示杂交信号。此方法灵敏度与同位素标记水平相当,简便快速,安全,是一种特异性好的检测手段,具有广泛的应用前景。HBV-DNA的HRP标记方法:...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。