免疫放射分析(IRMA)是从放射免疫分析(RIA)的基础上发展起来的核素标记免疫测定,其特点为用核素标记的抗体直接与受检抗原反应并用固相免疫吸附剂作为B或F的分离手段。IRMA于1968年由Miles和Heles改进为双位免疫结合,在免疫检验中取得了广泛应用。 一、基本原理 IRMA属固相免疫标记测定,其原理与ELISA极为相似,不同点主要为标记物为核素及最...
利用标记的核酸做探针与转化细胞的DNA进行分子杂交,可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上,用碱裂菌,菌落释放的DNA就吸附在膜上,再与标记的核酸探针温育杂交,核酸探针就结合在含有目的序列的菌落DNA上而不被洗脱。核酸探针可以用放射性核素标记,结合了放射性核酸探针的菌落集团可用放射性自显影(auroradiograp...
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
...耶细胞抗体对诊断副瘤性小脑变性(PCD)合并卵巢及 乳腺癌 高度特异。临床上常用 间接免疫荧光法 测定。 间接免疫荧光法实验原理: 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗I...
...耶细胞抗体对诊断副瘤性小脑变性(PCD)合并卵巢及 乳腺癌 高度特异。临床上常用 间接免疫荧光法 测定。 间接免疫荧光法实验原理: 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗I...
上皮组织来源的肿瘤是 人类 最常见的肿瘤。病理组织学上具有上皮特征的高分化肿瘤,一般不需要免疫标记即可明确其上皮性质。但对本质上为上皮组织来源而病理组织学上为低分化的肿瘤,仅靠病理组织学特征有时难以明确其起源,此时即有必要进行免疫标记。这一问题的解决包括以下三方面的含义:一是明确一个低分化肿瘤(不论原发生或转移性)究竟是否上皮组织来源;二是如果是上此组织来源...
上皮组织来源的肿瘤是 人类 最常见的肿瘤。病理组织学上具有上皮特征的高分化肿瘤,一般不需要免疫标记即可明确其上皮性质。但对本质上为上皮组织来源而病理组织学上为低分化的肿瘤,仅靠病理组织学特征有时难以明确其起源,此时即有必要进行免疫标记。这一问题的解决包括以下三方面的含义:一是明确一个低分化肿瘤(不论原发生或转移性)究竟是否上皮组织来源;二是如果是上此组织来源...
上皮组织来源的肿瘤是 人类 最常见的肿瘤。病理组织学上具有上皮特征的高分化肿瘤,一般不需要免疫标记即可明确其上皮性质。但对本质上为上皮组织来源而病理组织学上为低分化的肿瘤,仅靠病理组织学特征有时难以明确其起源,此时即有必要进行免疫标记。这一问题的解决包括以下三方面的含义:一是明确一个低分化肿瘤(不论原发生或转移性)究竟是否上皮组织来源;二是如果是上此组织来源...
某些抗原可以用荧光素标记,制成荧光抗原,标记荧光素的方法与制备荧光抗体方法相同。用荧光抗原可以直接检查细胞或组织内的相应抗体,特异性较好,敏感性较差。染色方法同荧光抗体染色的直接法。由于多数抗原难以提纯或量少不昂贵,一般很少采用此法。
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