心肌损伤早期标志物: 指心肌损伤后 6 小时内血中水平升高的标志物。 肌酸激酶 MB 同工酶( CK-MB ) CK-MB 可以诊断无骨骼肌损伤的 心肌梗死 ,也适用于早期诊断,其临床特异性高于 肌红蛋白 ,在不同时间重复此项检测有助于确诊 AMI ;溶栓治疗 90 分钟后,测值增加 4 倍,提示梗阻的血管再灌注成功。对 不稳定心绞痛 的病人, CK-MB
心肌损伤早期标志物: 指心肌损伤后 6 小时内血中水平升高的标志物。 肌酸激酶 MB 同工酶( CK-MB ) CK-MB 可以诊断无骨骼肌损伤的 心肌梗死 ,也适用于早期诊断,其临床特异性高于 肌红蛋白 ,在不同时间重复此项检测有助于确诊 AMI ;溶栓治疗 90 分钟后,测值增加 4 倍,提示梗阻的血管再灌注成功。对 不稳定心绞痛 的病人, CK-MB
...。图5.2中10nm的胶体金溶液中蛋白质的最适稳定量为45μg/ml。 图5-2 蛋白最适稳定量示意图 (2)目测法:以目测法确定胶体金与待标记蛋白质用量比例,将标记的蛋白质逐级稀释后(由5μg~45μg另设对照管),各取等体积顺序加入一系列装有1ml胶体金的试管中,5min后,在上述各管内分别加入0.1ml 10%氯化钠,依表5-5顺序进行。 表5-5 具...
...次固定液,过夜。 (2)随后,作10~40μm的冰冻切片,放入第一抗体血清作用12~18h,4℃,用含蔗糖的PBS洗数次。 (3)置于HRP标记抗体液(第二抗体)4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 (4)2.5%戊二醛(pH7.4磷酸缓冲液)再固定1h,4 ℃ 用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛,每次5min,共洗3次。 (5)D...
...位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物,在DNA聚合酶的介导下,经过多次变性,退火和延伸过程的重复性循环,大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时,经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大量制备。此法有普遍应用价值。 标记方法如下:待标DNA...
(一)基本原理 应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
1.HRP标记凝集素法 适用于小量的凝集素标记(Ponder 1983)。 (1)HRP的活化 ①将10mg HRP(SigmaType VI)溶解在1ml 0.3mol/L 的重碳酸钠溶液中(1.25g/50ml)。 ②加50μl含1%氟二硝基苯的无水乙醇溶液,室温轻度搅拌1h。 ③加1ml含0.06mol/L的过碘酸钠的蒸馏水(0.62g/50ml),室...
(一)基本原理 在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行杂交,再用抗地高辛抗血清相连胶体金与之结合,进行细胞或组织特异核苷酸的超威结构定位。为增强金的显示效应,可用银加强法增强...
...ern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“ 探针 ”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非 共价键 形式 吸附蛋白 质,且能保持电泳分离的多肽类型及其 生物学 活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗...
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