...胞,可初步HPV诊断。 (二)检测HPV DNA:根据不同 标本 采用点杂交或 原位杂交 检测HPV-DNA。亦可选择适当的特异序列,合成 引物 做PCR后进行杂交,PCR具有敏感,特异及可选择不同型别的引物 扩增 后分型等优点。 (三) 血清学 试验:应用 重组 技术表达 抗原 检测患者血清中lgG抗体。或抗原 免疫 动物制备 免疫血清 或 单克隆抗体 检...
...要进行相应的限制性内切酶消化和凝胶分离不同片段长度的DNA。故DNA提取要求高,小片段DNA存在会直接影响杂交信号。与之相反,多聚酶链反应(PCR)则可在相对粗制的小片段DNA样本上进行,分析所需的DNA很少,0.5μg甚至更少即可。PCR的模板DNA制备方法很多,除上述两种方法外,还有更简便的直接水煮法(Sle-bos,et al, 1990;Smit, ...
是以 病毒 RNA为模板,以4SRNA或 色氨酸 (t)RNA为 引物 ,4种dNTP为原料,根据 碱基配对 原则,在反向转录酶 催化 下合成DNA的过程。
...。就目前的研究资料显示,比较公认的有以下几个途径;①粪—口传播。随着新技术在Hp研究中应用,使提出已久的粪—口传播理论得到了证实。应用敏感的PCR技术已经在胃Hp阳性患者牙斑和粪便中发现了HpDNA。杨海涛在瑞士选用敏感的PCR引物,在几乎所有的牙斑标本中都检到了Hp。最近也有人从Hp感染者粪便中培养出了Hp,支持了Hp的粪—口传播理论。来自上海的市民和郊区...
...性钩体不同血清群patocⅠ株呈交义杂交现象。作者认为dna探针杂交技术是一种敏感性高的早期诊断方法。 ⑵dna基因扩增技术:聚合酶链反应(pcr)的dna扩增技术目前已引入钩体病的诊断领域。因pcr只要有引物便可进行试验,且方法简便,并适用于大数量标本的流行病学调查。vaneys等1989年用pcr扩增技术对哈焦型钩体感染的牛尿作了检测研究,提出pcr d...
...础的DNA疫苗,该所研究人员将HindⅢ酶切位点、MG7-Ag模拟表位和通用性辅助性T细胞(Th细胞)位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中,通过两次聚合酶链式反应将两种表位连接于一段载体基因,HindⅢ酶切位点位于载体片段与表位基因之间,将目的基因插入pUCm-T载体。酶切鉴定和序列测定证实后,利用pUCm-T载体和pcDNA3.1(+)载体共有的K...
...咬、抓伤,尤其在春季动物发情时,尽量少刺激动物,以免造成不必要的伤害。万一不幸被咬、抓伤后,应及时上医院注射狂犬疫苗。 实验室研究进展 1、PCR检测 核酸 扩增技术 的应用,尤其是 广谱 PCR技术和 基因 测序已 实验室研究 经成功用于检测和确诊巴尔通体感染。为评估PCR方法的检测效能,SophieW等用特异性 引物 对46名临床确诊的CSD病人进行ht...
...毒 抗原 ,敏感性比免疫电镜高,但诺瓦克病毒抗原与 抗血清 较难获得。 5.分子 生物学 检测技术 斑点杂交 法检测病毒 RNA ,或RT-PCR法 扩增 标本 中的病毒RNA,敏感性及特异性均较好。实验表明,敏感性最高的RT-PCR法用于诺瓦克病毒 感染 的实际检测工作中不像检测其他某些病毒那样能获得很高的阳性率。这可能是由于不同毒株间 基因组 的 变异 ...
...时间也可提早16~42天。 (二)HDV cDNA/聚合酶链反应(HCV cDNA/Polymerase Chain Reaction,RTPCR)测定肝和血清中HCV RNA。 本法是将HDV RNA逆转录为HCV DNA,选用高度保守的5′非编码区引物扩增放大后作电泳观察结果。本法较灵敏。由于肝和血清中HCv RNA出现较抗-HCV为早,一些HCV感染者...
...限性 感染 病,预后较好。帕里诺眼-腺综合征也可能为 结核病 、 兔热病 、 腹股沟淋巴肉芽肿 和 梅毒 等引起,但近来通过 血清学 检测和PCR技术测定汉赛巴通体特异性 DNA ,已证实此综合征是不典型猫抓病的最常见形式。 帕里诺眼-腺综合征的原因 (一)发病原因 本病 病原体 于1983年由Wear等证明为多型性 杆菌 , 革兰染色 阴性,曾称为 猫抓病...
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