...标记纯化的人IgG,制成免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双...
...DNA聚合酶,一对脱氧寡核苷酸引物、DNA合成所需要的4种脱氧核苷三磷酸以及保证聚合酶催化反应的Mg2+及缓冲液等。人工合成引物的序列设计是PCR成功的关键,一般两条引物的序列反应分别与欲获得的双链DNA两条链3’端的序列互补。先升高温度使...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp,但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10~15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针,同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
...技术难度大,特异性敏感性均不理想,且费时费钱。目前应用较多的是荧光标记的单克隆抗体的直接荧光抗体法,可快速确定系何种血清型衣原体敏感。80年代发民展的DNA探针技术,可将阴道分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/氯仿抽提等...
...膜上与32P标记SRY基因探针直接进行斑点杂交,或将羊水细胞DNA经0.7%琼脂糖凝胶电泳分离后进行Southern印迹杂交,凡出现杂交斑点或代的为男性,不显示或显示极弱者为女性。2.PCR基因扩增法测定性别以常规蛋白酶-SDS-酚法提取...
...注意结合抗体的每种色素都不干扰抗体反应的特异性,也不相互干扰。免疫荧光染色有直接法和间接法二类:①直接染色法1)取约106的细胞置于尖底离心管内,管内液体要少些。加荧光标记抗体,在4℃温度下静置15~30min。若作双标记染色也可直接加入。2...
...Immunotech公司。第二抗体为异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗鼠免疫球蛋白,购自军事医学科学院。结果判定:CD34细胞阳性率>10%为阳性指标,其余抗原阳性细胞>20%为阳性标准。 3寡核苷酸引物选择根据PCR引物设计原则,参考文献[4,6]设计...
...直接分析法,PCR产物RFLP分析法,等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交法等等,其中最多用且简单的方法有PCR产物直接分析法和PCR产物RFLP分析法。PCR产物直接分析法,是采用合适的引物,通过多次扩增,获得靶基因序列扩增片段,直接...
...使用前最好加热至50℃,使其充分溶解后再加入探针分子。至于探针的浓度视实验目的、探针类型及标记方法而异。通常RNA探针分子浓度为0.5~2μg/ml,DNA探针浓度为1μg/ml,此外,如使用35S标记的探针,还需加入终浓度为100mmol/...
...标记纯化的人IgG,制成免疫用的双抗原。动物免疫。动物:体重分别为2.5kg和3.0kg的雄性家兔2只。免疫:初次免疫是将含HRP20mg,IgG5mg的双抗原加等体积的福氏不完全佐剂多点、多部位注射于每只家兔的四肢。间隔1月后用原剂量的双...
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