...出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的 重组体 (recombinant)。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆,所以筛选(dcreening)是 基因 克隆的重要步骤。在构建载体,选择 宿主 细胞、设计 分子克隆 方案时都必须仔细考虑筛选的问题。以下就常用技术的基本原理加以介绍。 一、根据重组载体的标志作筛选 最常见的载体携...
单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是亲和层析中重要的配体,是免疫组化中主要的抗体,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器。 作为医学检验试剂,单克隆抗体可以充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强,可将抗原抗体反应的特异性大大提高,减少了可能的交叉反应,使试验结果可信度更大。单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量...
制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
克隆病是一种病因不明的、主要位于回肠末段的亚急性或慢性炎性病变,但也常累及结肠以及胃肠道其他部位,但后者十分罕见。 克隆病常呈慢性隐袭性发病,主要表现有 腹痛 、 腹胀 、 腹泻 、 恶心 、进行性 厌食 、 低热 和 体重减轻 。有的病人甚至不能确定自己何时起病,而在发生 肠梗阻 、 消化道出血 、 肠穿孔 和 肠瘘 等情况后才被诊断。腹痛多为阵发性绞痛,...
使克隆的基因在细胞中表达对理论的研究和实验的应用都是十分重要的意义的。克隆的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。有些具有特定生物活性的蛋白质在医学上、以至在工业上都是很有应用价值的,可以克隆其基因使之在宿主细胞中大量表达而获得。要使克隆基因在宿主细胞中表达,就要将它放入带有基因表...
...nzymedonor,ED)。两个片段本身均不具酶活性,但在合适的条件下结合在一起就具有酶活性。利用这两相片段的特性建立的均相酶免疫测定称为克隆酶供体免疫测定(clonedenzymedonorimmunoassay,CEDIA)。CEDIA的反应模式为竞争法,测定原理为:标本中的抗原和ED标记的抗原与特异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物。ED标记的抗...
单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是亲和层析中重要的配体,是免疫组化中主要的抗体,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器。 作为医学检验试剂,单克隆抗体可以充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强,可将抗原抗体反应的特异性大大提高,减少了可能的交叉反应,使试验结果可信度更大。单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量...
我院自1995—06~1995—12应用三联疗法和三黄胶囊对清除幽门螺杆菌(Hp)的临床疗效作对比观察。现报道如下。 1 对象和方法 1.1 对象 男40例,女20例。年龄25岁~60岁,全部症例均经胃镜证实为十二指肠球部 溃疡 ,且取胃窦部组织2块,作组织切片0.25%碱性品红法染色为Hp阴性。治疗前全部病例检测Hp抗体,均为阳性。 1.2 方法 治疗随机...
制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
克隆病是一种病因不明的、主要位于回肠末段的亚急性或慢性炎性病变,但也常累及结肠以及胃肠道其他部位,但后者十分罕见。 克隆病常呈慢性隐袭性发病,主要表现有 腹痛 、 腹胀 、 腹泻 、 恶心 、进行性 厌食 、 低热 和 体重减轻 。有的病人甚至不能确定自己何时起病,而在发生 肠梗阻 、 消化道出血 、 肠穿孔 和 肠瘘 等情况后才被诊断。腹痛多为阵发性绞痛,...
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