...RNA的转录合成从化学角度来讲类似于DNA的复制,多核苷酸链的合成都是以5’→3’的方向,在3’-OH末端与加入的核苷酸磷酸二酯键,但是,由于复制和转录的目的不同,转录又具有其特点:(1)对于一个基因组来说,转录只发生在一部分基因,而且...
...这一反应依赖于AMV逆转录酶、RnaseH和T7RNA多聚酶的共同作用。当逆转录酶合成cDNA第一链后,RnaseH降解模板RNA,逆转录酶合成cDNA第二链,T7RNA多聚酶以此cDNA为模板,转录出与样本RNA序列相同的RNA。其...
...叫“隐蔽期”。经胞饮进入细胞的病毒,衣壳可被吞噬体中的溶酶体酶降解而去除。有的病毒,如脊髓灰质炎病毒,在吸附穿入细胞的过程中病毒的RNA释放到胞浆中。而痘苗病毒当其复杂的核心结构进入胞浆中后,随之病毒体多聚酶活化,合成病毒脱壳所需要的酶,...
...1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶,该酶以RNA为核板,根据碱基配对原则,按照RNA的核苷酸顺序(其中V与A配对)合成DNA。这一过程与一般遗传信息流转录的方向相反,故称为反转录,催化此过程的DNA聚合酶...
...通过检测病原体遗传物质来确认病原体也许是检查病原体为直接的方法了。目前比较成熟的技术包括基因探针技术和PCR技术。(一)基因探针技术用标记物标记细菌染色体或质粒DNA上的特异性片段制备成细菌探针,待检标本经过短时间培养后,经过点膜、裂解...
...,效果更佳。 【操作方法】 1.将银制探针球头部自甲孔探入管道,从乙孔穿出,然后用丝线做成双套结,将橡 皮筋线结扎于探针的球头部,再由乙孔回入管道,从甲孔抽出(亦可在有孔探针的尾端扎一橡皮筋线,使探针自甲孔探入管道,由乙孔抽出),使橡皮筋线...
...核酸存在于多种细胞,如病毒、细菌、寄生虫、动植物细胞;多种标本中,如血液、组织、唾液、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种DNA、RNA的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所...
...这些方法。1.依赖mRNA或蛋白表达的方法如果已知某个基因的表达产物,则可以根据其氨基酸顺序合成寡核苷酸探针从cDNA文库中调出cDNA克隆;利用克隆的DNA片段也可直接筛选cDNA文库;通过Northern杂交法也可得到某一克隆片段内的...
...这些方法。1.依赖mRNA或蛋白表达的方法如果已知某个基因的表达产物,则可以根据其氨基酸顺序合成寡核苷酸探针从cDNA文库中调出cDNA克隆;利用克隆的DNA片段也可直接筛选cDNA文库;通过Northern杂交法也可得到某一克隆片段内的...
...自1969年以来,我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的...
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