核酸 一级结构 分析是 基因 分析最直接的第一手资料。目前 DNA 、 RNA 以及 蛋白质 的一级结构分析中,DNA的 碱基序列分析 方法多样、简单、快速。下面就M13 噬菌体 -双脱氧 核苷酸 (ddNTP)的DNA测序法介绍如下。 M13是 单链DNA 噬菌体, 转染 宿主 菌体复制为双链 增殖 ,又以 单链 形式透出菌体。把待测 DNA重组 插入双链...
(一)基本原理 利用性染色体X或Y的特异性DNA探针的ISHH技术进行胎儿生前(Prenatal)性别的诊断,样品取自于羊水、绒毛或胎儿的血液。近年,科技工作者又成功地进行了胚前(pre-embry-o)或植入前(preimplantation)的ISHH诊断。所谓胚前诊断是在受精卵植入子宫内膜前的4~6细胞期,以显微操纵器(micromanipulator...
1.主观感觉作用阈值 在确定受试人员安全的条件下,在实验室内直接对人进行 测试 ,求得水或大气中有害物质的刺激作用阈、嗅觉阈、味觉阈或颜色阈值,选择其中最低的阈值作为该物质主观感觉的限制浓度。 2.对健康作用阈值 通过动物试验,取得毒性的基本资料,包括慢性毒作用阈值,以及致癌、致畸和诱变试验的定性和定量的结果。然后选择适当的安全系数,提出初步的健康危害作用阈...
... 浓度很低( 总胆汁酸 2μg/ml),可用气相色谱、放射免疫、 高效液相层析 法及酶学分 析法 (以3α-羟类 胆固醇 脱氢酶 为工具酶)测定NADH生成量。可以测定血清总胆汁酸(TBA),用气相色谱、放射免疫和高效液相层析尚可对 胆酸 、 脱氧胆酸 及 鹅脱氧胆酸 进行分别测定,还可进行胆汁酸负荷试验及尿中 硫酸 结合型胆汁酸的测定。 测定血清胆汁酸可提...
...大压力的钢壁容器,即所谓的“弹”,其中有一可以通电的金属样品皿,放入一定量样品并且充以氧气。此“弹”放于四周有定量水的圆筒内,水与外界隔热。测定时通以电流,因有氧,遇火花样品完全燃烧,释放热量。读出水的温度变化后即可计算此样品所放出的热量。此为精确的直接测定法,但设备与操作均很繁复,应用不便。通常应用是从食物成份表计算食物内糖类、脂肪与蛋白质的含量,然后再分...
血浆中蛋白质种类繁多,对各种单一蛋白进行快速而又特异的定量。目前公认的方法是免疫测定法,即利用其特异的抗体,采用测定抗原抗体复合物的方式定量。血浆(清)中载脂蛋白是以脂蛋白形式存在的少量蛋白,在解联剂作用下,使载脂蛋白从脂蛋白中分离出来,再利用相应的载脂蛋白抗体进行测定。 载脂蛋白的免疫测定方法很多,目前采用的方法各有其特点,所需条件也有差异,现将医学检验中...
DNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下,将游离的四种脱氧单核苷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP,简写为dNTP)聚合成DNA的过程。 这是一个非常复杂的酶促反应,需要许多种酶和蛋白质参与,现分别叙述它们在DNA复制中作用。
测定清除率不仅可以了解肾的功能,还可能测定肾小球滤过率、肾血流量和推测肾小管转运功能。
信号转导过程中往往涉及多种激酶的活化,因而对这些激酶活性的测定可以作为信号转导研究中的一种重要指标。常见激酶活性的测定有PTK、PKC及PI-3K等。均有商品化的试剂盒。检测原理是根据激酶可以催化特定底物发生磷酸化,外源加入 32 γ-ATP,通过分离反应产物后测定放射活性,从标准曲线推算出样品酶的活性。前已提及,PKC从胞质向胞膜的转位是PKC活化的一个重...
...纤维化的诊断依据。这些纤维化指标的血清水平在单纯性脂肪肝时多在正常范围,脂肪性肝纤维化时多升高,脂肪性肝硬化时显著升高。因此,血清纤维化指标测定有助于确定脂肪肝的分期,推测脂肪肝的预后。但是肝纤维化血清诊断仍存在一定问题,每一种批号的检测试剂的灵敏性和特异性都有一定限度,而且在慢性肝病或肝硬化时会出现较大重叠。因此仅以这些血清学标志为基础对具体一个病人作出肝...
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