抗原和抗体是免疫学检验的两大重要因素，也是整个免疫反应的基本条件。抗原的纯化是制备特异性抗的先决条件，制得的抗体可用于纯化抗原和检测抗原。抗体有单克隆和多克隆两类。 单克隆抗体用杂交瘤技术制备（详见第十一章），多克隆抗体存在于免疫动物抗血清中。近年来又出现了基因工程抗体（单链抗体）。本章仅叙述抗原纯化和多克隆抗血清制备技术。
一、胶原的提取 动脉血管壁胶原提取的基本方法是，首先除去凝血等其他杂质，由于胶原为杆状三螺旋结构，能耐受胃蛋白酶的作用，但是两端球蛋白结构能被胃蛋白酶水解。胶原纤维内分子间的共价交联是由分子末端赖氨酸或羟赖氨酸形成，用胃蛋白酶切断末端交联结构，使胶原分子的巨形结构被破坏，从完整分子可提出各种类型的胶原。 （一）胶原的初步分离 1．小心取出动脉血管，用0.05...
银杏 酸及银杏酚的提取分离工艺探讨韩相永 马西欣 银杏外种皮含有醇、酚、酸等多种化学物质，不但有恶臭昧．而且对较多人的皮肤会发生强烈的刺激作用，引起 瘙痒 ，出现 皮炎 水疱，严重者出现痉挛和皮肤灼伤．说明银杏外种皮中含有较多的活性成分。有研究者曾用银杏外种皮作过 杀虫 剂及有关农药的研究探讨。多年来，银杏外种皮一直作为废物被丢弃，这既浪费了资源又污染了环境...
...体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞...
...去血管周围脂肪组织和纤维膜，用冷0.5mol/l PBS pH7.8洗涤，2kr/min离心10min。 2．用匀浆器破碎，加入15倍体积的提取液（0.05mol/L乙酸pH5.8、4.0mol/L盐酸胍、0.1mol/l6-氨基乙酸EDTA、3mol/L苄脒），于4℃缓慢振荡24h，10kr/min离心30min。 3．取上清透析浓缩30倍。 4．将提取液...
提取粘连蛋白的基本原理是用NaCl脱氧胆酸钠液提取血管壁中的粘连蛋白，再用高盐除去杂质，然后进一步用Sephacryl层析纯化，方法如下： 1．将动脉血管壁组织加10倍体积处理液（0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶），4℃搅拌20min，10kr/min离心10min。 2．沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6...
...境中不易分解而引起环境污染。可食性包装材料与合成包装材料一样，可以阻止食品吸水或失水，防止食品氧化串味，也可作为食品风味剂、营养强化剂等成分的载体，可食性包装材料正日益受到重视。但由于普通淀粉制成的可食性薄膜是水溶性的，要求待包装的食品要预先干燥处理，这就影响食品的风味和质量；而由胶原制成的薄膜，制造成本高，外观不理想，其应用受到限制。壳聚糖作为天然的高分子...
胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
1975年Kǒhler和Milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞（SRBC)免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个B细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗SRBC的单克隆抗体（monlclonalantibody,McAb）。迄今世界已研制成数以千计的McAb。 单克隆抗体的理化性状高度均一，生物活性单一，与抗原结合的特异性强，便于人为处理和质...
一、动物的选择 选择合适的动物进行免疫极为重要。选择时应考虑以直几个因素：①抗原与免疫动物的种属差异越远越好；亲缘关系太近不易产生抗体应答（如兔－大鼠之间，鸡－鸭之间）。②抗血清量的需要：大动物如马、骡等可获得大量血清（一头成年马反复采血可获得10000ml以上的抗血清）；但有时抗体需要是不多，选用家兔或豚鼠即可。③抗血清的要求：抗血清可分为R型和H型。H型...
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