...应选用精制IgG抗体,并加入500u/ml肝素抑制RNase。肝素系酸性多糖,其化学性质与核酸类似,能够与以核酸为底物的酶(RNase)结合,从而保护mRNA免受破坏。另外,ICC染色以DAB呈色时,核酸探针易吸附于DAB产物上,需注意。近年...
...生物体内有些组织,如神经组织中的蛋白质,对带负电荷的核酸探针较易吸附。经该液乙酰化处理后,可使切片标本表现带上负电荷,有排斥带负电的核酸探针,减少非特异吸附,降低反应背景的作用。4.RNA酶溶液取RNA酶A溶解于100ml DEPC水中,分装...
...稳定性,即在合理的贮存条件下保持原来的特性。按实验要求,将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液,用于制作标准曲线。(二)标记物标记抗原应具备:①比放射性高,以保证方法的灵敏度;②免疫活性好;③所用的核素的半衰期尽可能长,标记一次可较长时间...
...神经节细胞具有辐射抵抗力。轴浆流阻滞是放射性视盘病变的特点,或继发于视盘的缺血性改变。 视网膜细胞具有相对的辐射抵抗力,非复制的神经细胞都具有较高的辐射抵抗。而视网膜血管内皮细胞和周细胞的放射敏感性较高,易于受到放射损伤。...
...抗体产生细胞胞浆内含有相对多的抗原,故采用直接或间接法免疫细胞化学技术可简化步骤,节 省时间,降低成本。为了清除组织间弥散的免疫球蛋白,我们在固定前用PBS浸洗,取得良好的效果。用双标记免疫荧光技术可以在同一张切片上显示出两种不同的抗体...
...磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。目前多由仪器自动合成而用作DNA合成的引物(Primer)、基因探针(probe)等,在现代分子生物学研究中具有广泛的用途。表示一个核酸分子结构的方法由繁至简有许多种(图15-2)。由于核酸分子结构除了两端和...
...检验中取得了广泛应用。一、基本原理IRMA属固相免疫标记测定,其原理与ELISA极为相似,不同点主要为标记物为核素及最后检测的为放射性量。单位点IRMA的反应模式如图16-4。图16-4 单位点IRMA原理示意图抗原与过量的标记抗体在液相反...
...检验中取得了广泛应用。一、基本原理IRMA属固相免疫标记测定,其原理与ELISA极为相似,不同点主要为标记物为核素及最后检测的为放射性量。单位点IRMA的反应模式如图16-4。图16-4 单位点IRMA原理示意图抗原与过量的标记抗体在液相反...
...原子吸收光谱法、离子微电极测定法、放射示踪法及标记示踪法等。目前常用标记示踪法,即用荧光探针标记靶细胞。常用的荧光探针有quin-2/Am、Fura-2/Am及Indo-1等。Fura-2/Am和Indo-1较为敏感。2.IP3的测定 采用3...
...此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。(1)临界点干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS冲洗3min×3。如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA...
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