...在大肠杆菌T4噬菌体多聚核苷酸激酶(T4PNK)的催化下,将γ-32P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为:此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP,也...
...脂蛋白受体主要包括乳糜粒受体(CM-R)、极低密度脂蛋白受体(VLDL-R)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、高密度脂蛋白受体(HDL-R)和清道夫受体(scavenger receptor)等。脂蛋白受体的检测与一般受体检测方法的原理及...
...玫瑰花形成试验,淋巴细胞转化试验,血液淋巴细胞计数,T淋巴细胞计数及用单克隆抗体检测T细胞亚群以了解各亚群T细胞数和比例。4.分子生物学检测利用同位素32P或生物素标记的分子探针可以检出特异性的病毒核酸。近年发展起来的聚合酶链反应技术(...
...可以得到包含104以上的转化子的文库,再经前面介绍的筛选方法筛选特定基因克隆。用这种技术获得的DNA探针不含有内含子序列。因此尤其适用于基因表达的检测。...
...细胞内碱性磷酸酶含量低或因某些未死亡细胞能自行释放,从而影响法灵敏度和特异性。此外乳酸脱氢酶分子较大,仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放,故不能较早地反映效应的功能。(三)荧光法检测原则是用荧光素标记靶细胞,经与效应细胞共温后,离心法上清,用荧光...
...PBS冲去固定液,加含探针的杂交液覆盖(光敏生物素标记探针浓度为2.5ng/μl),在温盒中50℃孵育1~2h,取出后直接加入胶体金标记链亲合素(1mg/ml)室温孵育15min,然后在室温或37℃下用大容量(200ml/每片)洗脱液(2×...
...、特异和安全性。 在动物的脏器中,病毒含量较多,肌肉中病毒含量相对较少,课题组研发的检测技术,由于采用了特异性的荧光探针和高灵敏度的荧光PCR仪,使该方法比传统的PCR方法灵敏度高100—1000倍,即使是把发病的鸡肉稀释1万倍,也能检测出...
...Tepson(1981)采用宫内取胎儿血检测α1-AT和基因定型,成功做出产前诊断,但宫内取血有一定危险,不能普遍应用;Kidd(1983)取羊水做细胞培养,用核酸杂交探针方法,直接分析DNA,可做出产前诊断,已用于临床。如父母为杂合子...
...30min,以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q,空出补体结合点。CIC与C1q的结合可用多种方法进行检测,常用的有以下3种。(1)液相法:先将同位素标记的C1q与灭活过的血清标本混合作用,再加入0.5%(终浓度)的PEG将结合了C...
...也有利于口蹄疫的监测。 近年来,依赖核酸序列的扩增技术(nasba)经常被用来检测如禽流感病毒、新城疫病毒、病毒和口蹄疫病毒等引起的病毒性疾病。最近有学者通过检测从世界各地收集的200份疑似口蹄疫病毒感染样品,对nasba-电化学发光法(...
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