电子显微镜免疫细胞化学技术概述_《实用免疫细胞与核酸》在线阅读_【中医宝典】

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率限制,不可能从细胞超威结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超威结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体技术、铁蛋白抗铁蛋白复合物技术、蛋白A-铁蛋白标记技术免疫...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-10-1.html

缺口平移法标记生物素DNA探针(二步法)_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mmol/l ED-TA(Ph8.0)1μl终止反应。 已标记探针提纯:10mg/ml tRNA 2μl,10mmol/L Tris –HCl (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇,置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min,离心10min,真空干燥...

http://qihuangzhishu.com/969/523.htm

免疫荧光显微技术_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

免疫荧显微技术基本原理是:使荧光抗体与标本切片中组织或细胞表面的抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,于荧光显微镜下观察,在黑暗背景上可见明亮的特异荧光。 (一)标本的制作 荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位。因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果。在制作标本过程中应力求保持抗原的完整性,并在染色、洗涤和封埋过程中不发...

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四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...入5~20μg)溶于二甲亚砜(1mg/ml),取此溶液300μl,一滴一滴加入蛋白质溶液中,同时电磁搅拌。 (3)在室温中搅拌2h,避光。 (4)把结合物移入直径3cm,高30cm大小Bio –Gel P-6层析柱(用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过),流速为1.5ml/min。 (5)收集先流出的红色结合物,即为标记抗体,分装,4℃保存备用。

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核酸探针标记和检测_《基因诊断与性传播疾病》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...链以碱基配对规则一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。放射性同位素标...

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利用ISHH技术对肿瘤或癌前组织细胞间期染色体铺片进行研究_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...理 在恶性或癌前病变的组织,染色体组含量与结构的畸变在部分病例中与疾病的预后相一致。由于染色体基因的变化可能导致肿瘤的发生与进展,利用一些技术预测这些遗传物质的变化可为恶性肿瘤的检测及了解其进展和预后提供资料。流式细胞计(FCM)和染色体组型,即核型分析(karyothping analyses)等技术曾被用于这个领域的研究。FCM可测定肿瘤细胞DNA的含...

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美发现可预测卵巢癌患病风险遗传标记_【中医宝典】

美国耶鲁大学研究人员日前表示,他们发现了一种可以预测卵巢癌患病风险遗传标记。相关研究7月20日发表在美国《癌症研究》杂志网络版上。 研究人员发现,25%的卵巢癌患者体内都存在KRAS基因的一个变种,而普通人只有6%拥有这一变种;这一变种还在61%有乳腺癌及卵巢癌家族病史的卵巢癌患者体内出现。此外,与拥有其他致病基因变种的女性通常在年轻时患卵巢癌不同,拥有K...

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电子显微镜免疫细胞化学技术概述_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率限制,不可能从细胞超威结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超威结构水平研究抗原抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗体技术、铁蛋白抗铁蛋白复合物技术、蛋白A-铁蛋白标记技术免疫...

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受体与标记配体结合分析_《动脉粥样硬化》_【中医宝典大全】

为了体外研究脂蛋白细胞代谢和脂蛋白受体活性,早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞 125 I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是:用放射性同位素(常用 125 I)标记LDL后,与细胞(通常为培养的单层成纤维细胞)、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育,使LDL-R与 125 I-LDL充分结合,形成受体-配体复合物,再除...

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光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

光敏DNP由一连接臂组成,一端是2,4-二硝基苯,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μl,加入二甲亚砜25μl,每微克DNA加入光敏DNp 2μg(在避光条件下),混匀。(2)置入冰浴中,在特制灯10cm下照...

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