...密码子具有兼并性,如表22-4,单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的,但可以设计成对兼并引物,扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变,但核苷酸的数量应相同。兼并度越低,产物特异性越强,设计引物时应...
...及其产生等进行分析。目前筛选真正发生了同源重组的ES细胞的方案有数种,如正负双向选择法(positive and negativeselection,PNS)、标记基因的特异位点表达法及PCR法,其中用得最多的方法首推PNS法。其基本原理是...
...及其产生等进行分析。目前筛选真正发生了同源重组的ES细胞的方案有数种,如正负双向选择法(positive and negativeselection,PNS)、标记基因的特异位点表达法及PCR法,其中用得最多的方法首推PNS法。其基本原理是...
...离子交换法一般是制成离子交换层析柱,用于分离纯化短肽标记物。3.透析法 能将标记蛋白与小分子化合物很好地分离。4.电泳法可用来分离单碘化、多碘化及已受损伤的蛋白质。5.亲和层析法利用蛋白质与其特异抗体或受体的结合来分离、纯化标记蛋白质。此法...
....标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)生物素标记终止液:(四)DNA探针标记常用试剂的配制(1)10 ×缺口平移缓冲液...
...-Taq连接酶的发现及其在LCR中的应用,为LCR的实用化奠定了基础。实际操作时引物为4个,A、A、 A’和B、B’,分别与靶序列的正负链互补。每次连接反应的产物又可在下一轮反应中当模板,靶序列以指数形式扩增出来。用上面提到的标记检测方法,即可...
...由编码β-骨酰胺酶的质粒决定的,用这两种质粒标记的探针与阴道分泌物进行斑点杂交可分别探测淋病奈瑟菌及其抗药性。其特异性敏感性均很高。目前还制备出淋病奈瑟菌DNA探针、菌毛探针和RNA探针,也建立了各种特异性高,敏感性强、简便快速的右面放射性...
...引物在PCR反应中的浓度一般在0.1~1μmol/L之间。浓度过高易形成引物二聚体且产生非特异性产物。一般来说用低浓度引物经济、特异,但浓度过低,不足以完成30个循环的扩增反应,则会降低PCR的产率。...
...PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物...
...PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物...
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