...抗体产生细胞胞浆内含有相对多的抗原,故采用直接或间接法免疫细胞化学技术可简化步骤,节 省时间,降低成本。为了清除组织间弥散的免疫球蛋白,我们在固定前用PBS浸洗,取得良好的效果。用双标记免疫荧光技术可以在同一张切片上显示出两种不同的抗体...
...鉴定临床分离的Hp菌株方法。该方法简单快速、敏感性强、图形简单、易于比较。PCR—SSCP不仅可以用于大规模的Hp流行病学调查,而且能准确评估治疗后再现的Hp是复发还是再感染。中山医大一院应用随机引物扩增的DNA多态指模技术鉴别不同菌株的Hp...
...鉴定临床分离的Hp菌株方法。该方法简单快速、敏感性强、图形简单、易于比较。PCR—SSCP不仅可以用于大规模的Hp流行病学调查,而且能准确评估治疗后再现的Hp是复发还是再感染。中山医大一院应用随机引物扩增的DNA多态指模技术鉴别不同菌株的Hp...
...分析、探针制备等。注意事项:①DNA样品纯度高,Taq酶(和Klenow酶)有逆转录酶活性,DNA和RNA不能混在一起。②设计的引物分子内(特别3′端)和引物,1,2分子间不形成双链。选择性好,不增幅目的DNA以外区域的DNA。引物的G+C...
...、特异性均可达99%;或应用PCR对EHEC DNA序列分析,发现其溶血素AB基因为EHEC特有,其特异性强,敏感快速,3~4h可出结果。其他尚有对SLT1、SLT2两对寡核苷酸引物同时扩增的多重PCR法,但尚未在临床广泛应用。基因检测可...
...,再变性,印迹到硝酸纤维(Nc)滤膜上,用探针进行杂交,检测DNA的方法。自显影或显色用于DNA分析。以32P标记放射性探针为例,放射自显影观察结果。(图18-6)。图18-6 Southernblot体系前述分离、纯化的DNA样品5-10...
...关系进行基因诊断。2.连锁分析进行致病基因的鉴别与定位 前段说明已知疾病基因与遗传标记相关进行连锁分析以诊断疾病,然而要认识这种关系就需要:①有足够数量家系来确定这种连锁;②有适当可提供信息DNA标记。后者较易,前者则难,尤其是稀少的疾病,...
...关系进行基因诊断。2.连锁分析进行致病基因的鉴别与定位 前段说明已知疾病基因与遗传标记相关进行连锁分析以诊断疾病,然而要认识这种关系就需要:①有足够数量家系来确定这种连锁;②有适当可提供信息DNA标记。后者较易,前者则难,尤其是稀少的疾病,...
...相应的多种标记抗体。(2)间接荧光法:可克服直接法需制备多种荧光抗体的复杂操作。将组织或细胞上的抗原直接与相应抗体(不标记荧光)结合,此为第一抗体,再把能与第一抗体特异结合的荧光标记的抗免疫球蛋白抗体加入,此为荧光标记的第二抗体,观察结果与...
...孟德尔方式遗传。RFLP可用Southern印迹杂交法(见下节)检出。用Southern杂交检出RFLP时,如探针跨越切点,则被切开的两个片段均可与探针杂交,从而显示两条杂交带(图13-4)。图13-3 RFLP示意图箭头酶切位点;左图:...
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