杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小 鼠骨 髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长(选择原理后见),小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力,形成同时具备抗体分...
HLA-Dw特异性与HLA-DP特异性可分别通过纯合分型细胞(homozygote typing cell,HTC)及预致敏淋巴细胞试验(primed lymphocyte test,PLT)检测。二种方法的基本原理均是判断淋巴细胞在识别非已HLA抗原决定簇后发生的增殖反应。由于分型细胞来源困难以及操作手续繁琐,细胞学分型技术下正逐渐淘汰。
在肾脏疾病时,免疫细胞化学技术主要应用于肾脏穿刺组织的检查,也可应用于血清或肾脏洗脱液及尿液的特殊检查,兹分述如下:
上述传统的HLA分型方法有许多不足之处,近年来国内外已将HLA分型技术由抗原水平发展到基因水平。 (一)限制性片段长度多态性检测技术 这是首先建立的对多态性进行检测的DNA分析技术。个体间抗原特异性来自氨基酸顺序的差别,后者由编码基因的碱基顺序不同所决定。这种碱基顺序的差别造成限制性内切酶识位置及酶切位点数目的不同,从而产生数量和长度不一的DNA酶切片段。用...
紫外光显微镜 紫外光显微镜 ultraviolet microscope 最初是为了提高 光学显微镜 的辨晰力由A.Kh- ler所创研制的仪器,而现在继之以 显微分光光度计 在细胞 化学 上对 核酸 局部部位的检验和定量时使用。由于辨晰力与光的波长成反比,因此可以使用从超高压水银灯或卤素灯射出的短波紫外光,光学系统包括 载玻片 在内,皆使用石英制品。最近很...
(1)新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。 (2)PBS(pH7.5)冲洗3min×2,加入1mmol/l MgCl 2 蒸馏水洗洗3min×3,离心沉集细胞。 (3)将细胞团置于小纸板上,入液氮冷却的Freon中,取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作,再于-100 ℃ 蚀刻1min 。 (4)制做断裂面复型。 (5)再次氯酸钠清洗复型,蒸馏水洗后进行观察...
扫描隧道显微镜 (STM) 扫描隧道显微镜 scanning tunneling microscope 缩写为STM 简介 扫描隧道显微镜亦称为“扫描穿隧式 显微镜 ”、“隧道扫描显微镜”,是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质 表面结构 的仪器。它于1981年由格尔德.宾宁( G.Binning )及海因里希.罗雷尔( H.Rohrer )在IBM位于瑞士...
扫描隧道显微镜 (STM) 扫描隧道显微镜 scanning tunneling microscope 缩写为STM 简介 扫描隧道显微镜亦称为“扫描穿隧式 显微镜 ”、“隧道扫描显微镜”,是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质 表面结构 的仪器。它于1981年由格尔德.宾宁( G.Binning )及海因里希.罗雷尔( H.Rohrer )在IBM位于瑞士...
制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
自1969年以来,我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针;从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是,这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
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