一、动物的选择 选择合适的动物进行免疫极为重要。选择时应考虑以直几个因素:①抗原与免疫动物的种属差异越远越好;亲缘关系太近不易产生抗体应答(如兔-大鼠之间,鸡-鸭之间)。②抗血清量的需要:大动物如马、骡等可获得大量血清(一头成年马反复采血可获得10000ml以上的抗血清);但有时抗体需要是不多,选用家兔或豚鼠即可。③抗血清的要求:抗血清可分为R型和H型。H型...
一、目的要求 1.正确理解统计研究的三个基本步骤一搜集资料、整理资料、分析资料—和它们之间的关系。 2.学会拟制调查表,整理表的统计表的基本原则和方法。 3.重点学会如何对原始资料进行整理,并正确绘制图表。 二、内容、步骤 1.按下题要求自制调查卡片一份 某医师想观察胎盘娩出方式与人工 流产 史的关系,须要统计项目是人工流产史(流产胎次)和胎盘娩出方式(包括...
在将Taq DNA聚合酶引入PCR反应,并使之达到自动化之后,PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单,而且,许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用,因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,处理标本可使待扩增DNA暴露,能与引物复性。关于PCR标本制备各种专业书中介绍...
早期制备的胶体铁作为阳离子胶体是用于检查组织中阴离子的定位,其制备主要是通过三氯化铁(FeCl3)的煮沸完成的,如有:(1)FeCI3直接煮沸(Hale ,1946):(2)FeCl3溶于甘氨酸和氨水的混和液中(Rinehart,1951):(3)FeCl3倒入煮沸的二甲坤酸钠溶液中(Seno.et al,1983)。或FeCl3与二甲砷酸溶液一起煮沸(Se...
(一)抗原及其用量的选择 由于Ab2是针对Ab2Id的抗体,因而制备Ab2时应选择适当的Ab1作为免疫原。所用抗原的用量依照给予抗原的种类、次数、途径以受体动物的耐受性而有所不同。一般来说,当受体动物为小鼠时,常用Ab1最为50-200μg;若受体动物为家兔时,使用的Ab1量可达100-200μg。 (二)免疫动物的选择 抗独特型抗体可在自身体内、同类系、同...
...大学与石家庄珍极酿造公司的研究人员对啤酒酵母的回收利用方面进行了合作研究,在酵母壁的破碎技术方面取得了初步进展。 下面将啤酒酵母抽提物的最新提取技术作一介绍。 将啤酒厂排出的废弃酵母先用清水进行洗涤、过滤后移入带搅拌的保温容器中。在酵母泥中加水调至含干酵母10%~15%,用酸将混合物的pH调至4.5。在夹层中通入热水对容器进行保温,使混合物的温度保持在45℃...
利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短的探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
(一) 玻璃 器皿的清洁 制备胶体金的成功与失败除试剂因素以外玻璃器皿清洁是非常关键的一步。如果玻璃器皿内不干净或者有灰尘落入就会干扰胶体金颗粒的生成,形成的颗粒大小不一,颜色微红、无色或混浊不透明。我们的经验是制备胶体金的所有玻璃器皿先用自来水把玻璃器皿上的灰尘 流水 冲洗干净,加入清洁液(重铬酸钾1000g,加入浓硫酸2500ml,加蒸馏水至10000m...
一、血管壁细胞提取 1.以无菌术取动脉,立即放入4℃、5%水解乳蛋白Hanks液中漂洗,除去凝血。 2.用小镊剔除外膜纤维、脂肪组织,用剪子沿血管壁纵向剪开血管,用Hanks液洗2次。 3.可先分开内皮细胞和平滑肌细胞,也可不区分两类细胞,将血管切成小块,放入2%胶原酶,温浴12~18h。 4.梯度液选择40%~70%,40%梯度液应是4份precoll、1...
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