免疫荧光细胞化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一,是由Coons等(1950)建立,经过近43年的发展,免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与亲合化学技术如 葡萄 球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域;与激光技术、电子计算机和扫描电视等技术结合发展为定量免疫荧光细胞化学技术;荧光激...
此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。 (1)临界点干燥法 ①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4 ℃ 1~2h,PBS冲洗3min×3。 如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝胶化,将凝胶切成2mm左右的小块,用30%的甘油—PBS浸透后置于用液氮冷却的Freon中冷却。 ②冷冻断裂,...
70年代以来,由于免疫组织化学方法的广泛应用,在技术方法上不断得以改进,涌现了一批新的技术方法,其特点为一些具有双价或多价结合力的物质如如植物凝集素(Lectin)、生物素(Biotin)和 葡萄 球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A, SPA)等被应用于免疫细胞化学技术,从而建立了SPA—HRP法、ABC法、BRAB法和LAB法等。...
HLA分型并不只是一种应用性的临床检测指标,免疫遗传学研究的发展,很大程度上依赖于以分型为主要手段的HLA多态性分析。60年代建立的并不断完善的血清学及细胞学分型技术主要侧重于分析HLA产物特异性;80年代起建立的DNA分型方法则侧重于基因的分型。
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中,新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外,80年代,新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述,本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【半抗原交联抗体法(Hapten –Coupled techni...
制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
...末端 。Alu I的切割位点如下: 5'-A G^C T-3' 3'-T C^G A-5' 在已发现的限制性内切酶中,近百种酶的识别顺序已被测定。有很多来源不同的酶有相同的 碱基 识别顺序,这种酶称为“ 异源 同功酶”(isochizomer,同切限制内切酶; 同裂酶 )。应该注意的是,这些酶虽然有相同的识别顺序,但它们的切点并不完全一样。例如Xma I和S...
...末端 。Alu I的切割位点如下: 5'-A G^C T-3' 3'-T C^G A-5' 在已发现的限制性内切酶中,近百种酶的识别顺序已被测定。有很多来源不同的酶有相同的 碱基 识别顺序,这种酶称为“ 异源 同功酶”(isochizomer,同切限制内切酶; 同裂酶 )。应该注意的是,这些酶虽然有相同的识别顺序,但它们的切点并不完全一样。例如Xma I和S...
...末端 。Alu I的切割位点如下: 5'-A G^C T-3' 3'-T C^G A-5' 在已发现的限制性内切酶中,近百种酶的识别顺序已被测定。有很多来源不同的酶有相同的 碱基 识别顺序,这种酶称为“ 异源 同功酶”(isochizomer,同切限制内切酶; 同裂酶 )。应该注意的是,这些酶虽然有相同的识别顺序,但它们的切点并不完全一样。例如Xma I和S...
...末端 。Alu I的切割位点如下: 5'-A G^C T-3' 3'-T C^G A-5' 在已发现的限制性内切酶中,近百种酶的识别顺序已被测定。有很多来源不同的酶有相同的 碱基 识别顺序,这种酶称为“ 异源 同功酶”(isochizomer,同切限制内切酶; 同裂酶 )。应该注意的是,这些酶虽然有相同的识别顺序,但它们的切点并不完全一样。例如Xma I和S...
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