...以HBV DNA为例。取HBv DNA质粒0.5μg,随机引物(Pharmacia)2μg,用TE(pH8.0)补足体积至10μl;100℃,热变性5min,骤冷10min。加10×缓冲液(500mmol/l Tris –HCl (Ph...
...缓冲液的等量混合液作封裱剂。(五)镜油一般暗视野荧光显微镜和用油镜观察标本时,必须使用镜油,最好使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。...
...65℃水浴4h,加200μl酚和氯仿:异戊醇(24:1)各提两次,上清加无水乙醇1.0ml放置于-20℃2h,以12kr/min离心5min,真空干燥后加50μlTE缓冲液溶解,4℃保存备用。2.多聚酶链反应Primer1:5'-GTGACC...
...缓冲液溶解。Sep-Pak C18柱层析,也可用于制备标记抗原时的层析纯化。(2)加膜藻土提取法:①抽血:用一次性塑料注射器抽取受试者静脉血4ml,置于加有肝素(125单位/ml 全血)指形管中。②分离血浆:在4℃下离心,取出血浆。③血浆...
...的冷酒精固定组织进行CEA和SC的研究,效果仍很好。对多肽类激素的研究可以用4%多聚甲醛缓冲淮,Bouin 缓冲液或福尔马林缓冲液进行固定,或直接液氮固定后冷冻切片。冷酒精固定的组织不宜进行多肽类激素的研究。对陈旧性福尔马林的固定的组织可以...
...mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚和氯仿抽提。所得DNA虽不完整,但可被限制性内切酶切割,因而适于点杂交,印迹杂交等多种分子生物学实验。Dubeau等(1986)在上述方法上作了改进。首先通过组织切片用二甲苯脱蜡,保证了组织的完全...
...取得了进展。①DNA提取液主要含SDS和蛋白酶K的TE缓冲液。固定和包埋组织由于化学修饰作用,使得DAN与蛋白质不易分离。因此,必须增加SDS和蛋白酶K的浓度和作用时间:SDS可增至1%~2%,蛋白酶K200~500μg/ml,最高可达1...
...65℃水浴4h,加200μl酚和氯仿:异戊醇(24:1)各提两次,上清加无水乙醇1.0ml放置于-20℃2h,以12kr/min离心5min,真空干燥后加50μlTE缓冲液溶解,4℃保存备用。2.多聚酶链反应Primer1:5'-GTGACC...
...精密度达0.002pH单位,准确性达到±0.09pH单位。pH电极稳定性好,计数不漂移。⒉PCO2电极PCO2电极属于CO2气敏电极。主要由特殊玻璃电极和Ag/Agcl参比电极及电极缓冲液组成,如图5-8所示。这种特殊的玻璃电极是对pH敏感...
...L为宜,但我们实验发现,最适浓度远远低于此浓度。(三)缓冲液PCR反应的缓冲液的目的是给Taq DNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件。目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/L Tris-HCl (pH8.3-8.8,20℃) Tris...
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