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（一）培养液 （1）RPMI1640培养液：称取RPMI培养基9.8g，碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml，加双蒸水至1000ml，调节 pH7.2～7.4无菌过滤冻存备用。 （2）小 牛血 清商品：成都生物制品厂。 （3）植物凝集素（PHA）：自制或成品（重庆药检所）。 （4）pH调整液：5%NaHCO 3 溶液高压灭菌（8磅15min），0.1N稀盐
前面已经介绍了核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键（主要是氢键）的形成即出现稳定的双链区，这是核酸分子杂交的基础。杂交分子的形成并不要求两条单链的碱基顺序完全互补，所以不同来源的核酸单链只要彼此之间有一定程度的互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进行。由...
大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exonucleaseⅢ）是从带3’-OH末端的双链DNA，按3’→5’方向切除5’单核苷酸： 大肠杆菌核酸外切酶Ⅶ则是从单链DNA的3’端和5’端切除寡核苷酸（两种形式）： （1）（2） 前一种酶需要镁离子作辅助因子才有活性；后一种酶则不需镁离子，因此即使在有螯合剂EDTA的情况下也有活性。另一种从噬菌体λ感染的大肠杆菌中提取的λ核酸...
前言 第一章 总论 第一节 有关的免疫学理论（缺） 第二节 免疫细胞化学的有关技术概述 一、抗体的制备和配制 二、组织材料的处理 三、免疫染色 四、对照 五、免疫细胞化学结果的判断 第三节 有关细胞和组织学技术 一、细胞和组织 二、细胞和组织的固定 三、组织切片技术 参考文献 第二章 抗原和抗体的制备 第一节 抗原的制备（缺） 第二节 抗体的制备 一、抗血清...
核酸酶S1（nucleaseS1）主要是降解单链DNA或单链RNA。对单链DNA的活性更高。它的用途是切除DNA片段的单链末端使之成为平头末端，切 开合 成dscDNA时形成的“发夹”环以及分析DNA-RNA杂合子的结构。
核酸的多核苷酸链在次级键的基础上，还可形成更为复杂的二级及三级的高级结构。
将 免疫学 方法( 抗原抗体 特异结合)与 荧光标记 技术结合起来研究特异 蛋白 抗原 在细胞内分布的方法。由于 荧光素 所发的荧光可在 荧光显微镜 下检出，从而可对抗原进行 细胞定位 。 技术原理 免疫荧光 细胞化学 是根据 抗原抗体反应 的原理，先将已知的抗原或 抗体 标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种 荧光抗体 （或抗原）作为 分子 探针 检查 细胞...
...是一种已知特异性的分子，它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体，以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交，形成杂交体，再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断，称为分子杂交基因诊断。此法开始用于遗传性疾病的诊断如血红蛋白病的诊断、先天性遗传病的产前诊断。近...
...现抑制探针杂交的“发夹”状结构。 ④避免单一碱基的重复出现（不能多于4个），如-CCCCC-。 ⑤一旦选定某一序更符合上述标准，最好将序列与核酸库中核酸序列比较，探针序列应与含靶序列的核酸杂交，而与非靶区域的同源性不能超过70%或有连续8个或更多的碱基的同源，否则，该探针不能用。 按上述原则选出的探针会增加成功的机会，选定后进行合成与标记，并摸索合适的杂交条...
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