动脉粥样硬化 病灶 主要涉及两类血管细胞即血管内皮细胞和中膜平滑肌细胞（SMC），本节主要就这两类细胞进行讨论，介绍一般培养和鉴定方法。 一、血管内皮细胞的培养方法和特性 人和动脉不同部位、不同血管如大动脉与小动脉、毛细血管，以及静脉血管之间存在差异，在处理这些细胞时应分别对待。血管内皮细胞形态较小，近似圆形，呈均匀排列，一般取材于人和动物的 脐带 。 1．...
DNA做为遗传物质的基本特点就是在细胞分裂前进行准确地自我复制(selfreplication)，使DNA的量成倍增加，这是细胞分裂的物质基础。1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型指出，DNA是由二条互补的脱氧核苷酸链组成，所以一条DNA链上的核苷酸排列顺序是由图16-1双螺旋DNA的复制另一条决定的。这就说明DNA的复制是由原来存在...
从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断的先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净，又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中，SDS是离子型表面活性剂，主要作用是：（1）溶解膜蛋白而不破坏细胞膜；（2）解聚细胞中的核蛋白；（3）与蛋白质结合，使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...
...面吸附有蛋白质分子。 （2）纯化后免疫金探针是否保持很好的生物学活性是判断其质量好坏的主要指标，因此，在使用之前必须对它的特异性，敏感性进行鉴定。鉴定举例，用阳性抗原片，脱蜡至水，胰蛋白酶消化，加第一抗体（多克隆或单克隆），一般过夜再加标记抗同一抗特异性抗体结合的胶体金溶液（多克隆或单克隆抗体标记的胶体金）详细方法步骤见后IgGS法，一般做1：2，1：4，1...
提取方法较多，各有优缺点。1969年Bornstein和Ross先用5mol/L盐酸胍抽提，再用胶原酶水解其他非弹性蛋白组分，最后还原二硫键，分离提取弹性蛋白。具体方法如下： 1．将动脉血管壁洗净，小心除去附着结缔组织。 2．将血管壁组织浸于4℃ 50%的吡啶液，破碎组织，3kr/min离心15min。 3．取沉淀用蒸馏水洗涤3次，真空干燥后研成粉末。 4．...
...让具有传统优势和特色的中药大步走向世界，并屹立于世界优秀民族文化之林，是每一位跨世纪的中药人不能不深思的问题。 l从国外对植物药的定义看植物提取物 在欧洲，草药已被列入植物药范畴内。在德国E委员会(由临床医生、 甘草 已很少。因此，在开发利用天然药物资源的同时，要重视物种资源，特别是珍稀濒危物种的保护，做到合理采收、生产繁殖，建立种质资源库及自然保护区，运用...
中药提取物是从中药产业中分化出来的新兴领域，是对中药材的深度加工。中药提取物的本质是中药原料药，具有投入少、技术含量高、产品附加值大、国际市场广泛等优势和特点。中药提取物经多年的发展，已具备一定的产业规模，出口比例已超过中药，并呈现上升趋势。但是，中药提取物在研制、生产、流通等各个环节缺乏必要的管理规范，严重地损害了中药出口产品在国际上的形象，致使中药提取物...
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同，所不同的是：（1）杂交时需先在高温80～95℃短时处理，使DNA探针及细胞内靶DNA变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤...
一、抗血清的鉴定 动物血采集后，立即分离出血清，此抗血清在保存或应用前，必须作效价和特异性鉴定。 （一）双向免疫扩散法鉴定抗体的特异性 按双向免疫扩散技术打两排孔，上排放抗原粗提物（如抗原来自动物血清则放相应的混合血清）和纯化抗原，下排加抗血清，进行双扩散18～24h后，仔细观察上下两排孔之间出现的沉淀线。若与粗抗原及纯抗原之间皆出现一条沉淀线，且两者互相融...
目前的研究指出，用免疫细胞化学检查病 人血 清中的dsDNA抗体为作为 系统性红斑狼疮 的诊断依据之一。佐佐木毅等和徐世玉等发现一些临床症状和血清学检查不典型的 红斑狼疮 病人，在发病早期就出现抗dsDNA抗体，认为这可能有助于早期诊断。 1．用马疫锥虫抗原检测抗dsDNA抗体方法 （1）底物制备：用马疫锥虫感染小鼠2～4天后，取小鼠的外周血，按血液细胞计数...
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