疟疾 的血清学诊断方法颇多,本节仅介绍常用的间接免疫荧光试验法。
疟疾 的血清学诊断方法颇多,本节仅介绍常用的间接免疫荧光试验法。
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
(一)荧光的产生 一此化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态,当其从激发态再回复到基态时,过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。 荧光发射的特点是:可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能,发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。 可以引起发荧光的能量种类很多,由光激发所引起的荧光称为致荧光。由化学应所引起的称...
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
开展显微外科手术需要一定的工作条件,包括光学放大设备、显微外科手术器械和显微缝合针线,以及显微外科技术训练等。 (一)光学放大设备 包括手术显微镜和手术放大眼镜(图15-1,图15-2)。共显微外科手术使用的手术显微镜与一般显微镜不同,应具备几点要点: 1.放大倍数在6~15倍,有些要求25~30倍,可随意变换倍数,用手及脚踏控制变倍,变焦距和位置。 2.工...
一、时间分辨荧光免疫测定
...置于眼底照像机的托架上,颏部紧贴支架用固定带固定,臂部平放于检查台上。 (三)先拍摄眼底普通像和加用激光滤光片和栅滤光片的对比像,以排除自身荧光和假荧光。 (四)应用荧光素钠为造影剂,用量为10~15mg/kg体重,10%荧光素钠成人一般用量为5ml,静推;20%者为3ml,静推。 (五)为注射方便,可采用三通双管注射器,2个注射器内分别装有0?.5%~1%...
以常用荧光素作为标记物的荧光免疫测定往往受血清成分、试管、仪器组件等的本底荧光干扰,以及激发光源的杂射光的影响,使灵敏度受到很大限制。时间分辨荧光免疫测定(timeresolvedfluorescenceimmunoassay,TR-FIA)是针对这缺点加以改进的一种新型检测技术。其基本原理是以镧系元素铕(Eu)螯合物作荧光标记物,利用这类荧光物质有长荧光寿...
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
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