...finger)和螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix)结构。并且受用足迹法(foot printing)分析新发现核转录因子结合DNA的位置和核甘酸序列。随着分子生物学核技术的发展,信号转导研究取得很大进展。采用基因克隆技术...
...时,底物以脂溶性4-氯-1-萘酚或联茴香胺较水溶性DAB溶液为好,也可用金标、I125标抗体作为二抗,通过银染或放射自显影技术显示Apo(a)蛋白区带,但此类方法已较少使用。将生物素标记的抗体作为二抗,通过生物素-亲和素系统放大信号,可...
...tyf-1F3(探针)ATTGCGCCAGCATGTAG 114-130F4(探针)ATTGCGCCGGCATGTAG 114-130(二)操作方法1.采集标本,根据病人的情况可采取局部分泌物,抽取淋巴结液,羊水,血清,脑脊液。用适量的...
...梅毒的核酸探针 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。 分子杂交法:阴性 阳性:梅毒感染。...
...仪固相亚磷酸三酯法合成并纯化。b.标记:按Riely等方法略有修改。以末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)催化Bio-11-dUTP标记到合成的寡核苷酸探针片段3′-OH端。反应体系含:140mmol/L二甲胂酸钠,30mmol/l ...
...19。目前全世界人口为50亿,即5×109。因此,两个个体的DNA杂交带型完全相同的可能性极小。表23-8 随机匹配的个体间“DNA指纹”相同的概率探针DNA片段大小(k)每一个体中片段出现的数目±SDA个体中的片段也出现于B个体的概率A10...
...非同位素标记物很多例如:生物素(biotin),地高辛(Digoxigenin),汞(mercury),溴(bromine)和碱性磷酸酶等,其中目前应用最多的是生物素和地高辛。将此法与免疫组化PAP法或ABC法联合使用,能成功地显示一些...
...所谓免疫(Immune PCR)就是利用抗体与DNA特异结合来检测抗原,把抗原抗体反应与PCR联合应用而建立的一种抗原检测系统。在免疫PCR中,一个中介分子同时具有与DNA、抗体分子特异结合的能力。其一端连接DNA(标记物),另一端连接...
...总体积为20μl,在12~14℃反应12~16h。(8)连接反应液可置-20℃保存,供转化用。(9)关于待插入DNA片段的获得参见附注。(二)大肠杆菌感受态的制备及重组DNA的转化1.感受态的制备(1)接种单菌落于2mlLB培养液中, 37...
...最多,最好的技术。一、Sanger双脱氧链终止法原理通常DNA的复制需要:DNA聚合酶,单链DNA模板,带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物,4种dNTP(dATP、dGTP、dTTP和dCTP)。聚合酶用模板作指导,不断地将dNTP加到...
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