...方法主要是PCR和核酸杂交。血清学诊断方法有中和试验、间接免疫荧光试验、反向间接血凝试验和ELISA方法等。 阴性。 中和抗体为IgG型,出现较晚。脊髓灰质炎病毒感染后,在发病后2~3周达高峰,1~2年内逐渐下降,持续时间很长,一直保持一定...
...所得到的目的序列或基因的克隆,都要用其核酸序列测定来最后鉴定。已知序列的核酸克隆要经序列测定确证所获得的克隆准确无误;未知序列的核酸克隆要测定序列才能确知其结构、推测其功能,用进一步的研究。因此核酸序列测定是分子克隆中必不可少的鉴定步骤。...
...德国Freiburg 大学儿童医院Erika Heninger等报道,他们发现了青少年或1型肾消耗病(髓质囊肿病,NPH1)一种新分子遗传诊断方法,它可检测到纯合子的缺失。但只适用于有NPH1杂合子缺失和其它NPHP1等位基因发生点突变的...
...用限制性内切酶水解,进一步确定扩增产物的特异性。(二)分子杂交分析分子杂交既是检测PCR产物特异性的一种较好的方法,也是检测扩增产物的非限制性内切酶位点上碱基突变的有效方法。分子杂交法是根据标记探针与两条引物链之间特异DNA片段的互补性进行...
...按限制酶的组成、与修饰酶活性关系,切断核酸的情况不同,分为三类:Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在...
...LP-PCR(Labelled Primers PCR)是利用同位素、荧光素等对PCR引物5’端进行标记,据此检测目的基因的存在与否,与常规PCR相比更为直观,省去了限制性内切酶酶切及分子杂交等繁琐步骤,而且一次可以同时分析多种基因成分,...
...核酸存在于多种细胞,如病毒、细菌、寄生虫、动植物细胞;多种标本中,如血液、组织、唾液、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种DNA、RNA的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所...
...分子生物学是在生物化学基础上发展起来的,以研究核酸和蛋白质结构、功能等生命本质的学科,在核酸、蛋白质分子水平研究发病、诊断、治疗和预后的机制。其中基因工程(基因技术,基因重组)是目前分子生物学研究热点,这些技术可以改造或扩增基因和基因产物...
...一、基因组DNA文库从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方法(超声波、搅拌剪力等)或酶法(限制性核酸内切酶的不完全酶解)将DNA降解成预期大小的片段,然后将这些片段与适当的载体(常用噬菌体、粘粒或YAC载体)连接,转入受体细菌或细胞,...
...10%患者,尤其是分化差的肿瘤或涉及到该肿瘤的组织来源和功能状态时,难以确诊。随着现代科学技术包括免疫荧光和免疫组织化学、免疫电子显微镜、自动图象分析技术、流式细胞仪、细胞遗传学技术和原位分子杂交技术等。这些新技术的应用,无疑大大促进了肿瘤...
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