...100~400nt为宜,过长则杂交效率减低。最近研究结果表明,寡核苷酸探针(16~30nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针。因此,寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是组织原位杂交的优选探针...
...、特异性均可达99%;或应用PCR对EHEC DNA序列分析,发现其溶血素AB基因为EHEC特有,其特异性强,敏感快速,3~4h可出结果。其他尚有对SLT1、SLT2两对寡核苷酸引物同时扩增的多重PCR法,但尚未在临床广泛应用。基因检测可...
...技术中最常用的工具酶酶主要用途限制性核酸内切酶识别DNA特定序列,切断DNA链DNA聚合酶Ⅰ或其大片段(Klenow)①缺口平移制作标记DNA探针②合成cDNA的第二链③填补双链DNA3’凹端④DNA序列分析耐热DNA聚合酶(Taq DNA...
...诊断,开拓了广阔的前景。免疫细胞化学技术日新月异,以惊人的速度发展。尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密切,基因探针、核酸分子杂交技术、原位PCR技术、核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员,...
...诊断,开拓了广阔的前景。免疫细胞化学技术日新月异,以惊人的速度发展。尤其是和分子生物学的理论和技术日益结合密切,基因探针、核酸分子杂交技术、原位PCR技术、核酸杂交和免疫细胞化学双标记技术、电镜杂交技术等成为免疫细胞化学技术的新发展成员,...
...结合应用葡聚糖珠寡核苷酸杂交技术可进一步提高方法的特异性和效率。其原理是:制备引物A、B,引物A与待检RNA3’端互补,并有一T7RNA多聚酶的识别结合位点。逆转录酶以A为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3’端互补,逆转录酶同时还具有...
...添加少量表面活性剂的情况下,即制备出具有较优异性能的米非司酮固体脂质纳米粒(SLN)。值得关注的是,冷冻干燥保护剂海藻糖的试样,其中以20%浓度的样品最小,只有0.121,远远小于冻干前试样的(0.246),显示出相当窄的粒径分布范围,这将...
...琼脂糖凝胶电泳、0.5μg/ml溴化乙锭染色,以PGEM-3Zf(+)DNA-Hae Ⅲ为分子量标准,置紫外透射仪观察结果。② 生物素寡核苷酸探针的检测a.探针序列及合成:探针序列为5′...
...;PCR方法扩增的目的DNA片段可直接用作序列分析,较常用的通过克隆、培养扩增、纯化制备等步骤获得测序片段更为简便。3.灵敏度高PCR产物的生成是以指数方式增加的,所以欲扩增pg量级的起始物到μg水平或放大真核细胞单拷贝基因,通过PCR方法...
...制备颈围的材料一般无严格要求,可用硬纸板、泡沫塑料、硬塑料片、皮革、毛毡或其它类似物品。基本要求以柔软、透气、不怕水、并具有韧性的材料为佳。一般以硬纸板最为常用。按患者自身颈部的长短、粗细尺寸,剪成后宽前窄的长条形,长度大约是颈部周径再加...
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