...载脂蛋白基因的分离是通过用相应的cDNA作为探针筛选基因文库而完成的。比较基因的核苷酸序列与cDNA的核苷酸序列得以鉴定基因的内含子与外显子数目以及它们的分界线。大部分真核细胞的基因含有内含子，内含子不编码氨基酸，但有些内含子参与基因表达...
...L NaCl,0.01mol/L Tris,Ph6.8,含30000～50000cpm/10μl3h cRNA）。（5）杂交后冲洗，金网自杂交液中取出后立即用大量的2×SSC冲洗多次。RNA酶溶液（20μg/ml）室温冲洗，然后再用2×...
...分析、探针制备等。注意事项：①DNA样品纯度高，Taq酶（和Klenow酶）有逆转录酶活性，DNA和RNA不能混在一起。②设计的引物分子内（特别3′端）和引物，1，2分子间不形成双链。选择性好，不增幅目的DNA以外区域的DNA。引物的G＋C...
...同位素3H的标记优于其它的标记物。（二）基本操作方法1．Y染色体3H标记DNA探针原位杂交技术（1）探针标记，以3H标记Y染色体DNA探针（详见第19章 ）。（2）原位杂交①RNA酶的前处理：取1ml RNA酶保存液（10mg/ml）于...
...总论 第一章 基因诊断与性传播疾病 第一节 基因诊断的分子生物学基础 一、DNA及RNA的化学组成 二、DNA分子结构 三、RNA分子结构 四、核酸的理化性质 五、DNA的复制 第二节 核酸分子杂交法 一、核酸探针的种类 二、核酸探针的...
...总论 第一章 基因诊断与性传播疾病 第一节 基因诊断的分子生物学基础 ◦ 一、DNA及RNA的化学组成 ◦ 二、DNA分子结构 ◦ 三、RNA分子结构 ◦ 四、核酸的理化性质 ◦ 五、DNA的复制 第二节 核酸分子杂交法 ◦ 一、核酸探针...
...，因此这类酶又称为依赖DNA的DNA聚合酶(DNa dependent DNA polymerase, DDDP)。②需要RNA或DNA做为引物(primer)，即DNA聚合酶不能从头催化DNA的起始。③催化dNTP加到引物的3′桹H末端，...
...ColiDNA polymerase）主要有3种作用：①5’→3’的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA，填补DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。②3’→5’的外切酶活性。消除在聚合作用中掺入的错误核苷酸。③5’→3’外切酶活性...
...，分子量约为8×102道尔顿。高分子溶液的粘度比一般溶液的粘度要大得多，不规则团分子比球状分子的粘度要大，而线形分子的粘度更大。因此在溶液中呈线形分子的DNA，即使是极稀的溶液，也具有极大的粘度。RNA溶液的粘度要小得多。当核酸溶液在某些...
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