分子病理学研究中的应用_《实用免疫细胞核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...现在回顾性DNA分析仅用于确定少数特异性诊断,但随着越来越多感染性病原基因特异性肿瘤基因和遗传病基因识别和克隆,相信不远将来基因诊断应用范围会进一步拓宽,分子杂交等基因分析技术将会在病理学诊断和研究中发挥越来越重要作用。(张建中)...

http://qihuangzhishu.com/969/505.htm

DNA复制_《医学遗传学基础》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...以自己为模板(template)吸收周围游离核苷酸,按碱基互补原则,进行氢键结合。在一些聚合酶作用下,合成新的互补链,原来模板单链并列盘旋在一起,形成了稳定双螺旋结构(图3-4)。这样新形成2个DNA分子原来 DNA分子碱基顺序...

http://qihuangzhishu.com/956/35.htm

鼠疫检测_传染病_【中医宝典】

...基因设计并合成一对特异PNA探针,经生物素标记后,分别链霉亲和素包被磁珠或Cy5纳米颗粒结合;探针待测鼠疫菌DNA杂交后,磁性纳米颗粒牢固连接靶核酸-探针结合体,用磁分离架收集后即可得纯化特异核酸分子,经变性处理后对Cy5荧光纳米...

http://zhongyibaodian.com/chuanranbing-2/b1413.html

诊断_《基因诊断性传播疾病》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...三DNA探针已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。四聚合酶链式反应(PCR)(一)标本采集及处理采集标本包括患者血液尿,以及腺体组织等。由全血制备血沉棕黄层(...

http://qihuangzhishu.com/994/105.htm

应用特异单引物法标记DNA探针_《实用免疫细胞核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...HCl pH7.5, 10mmol/L MgCl2BSa 5mmol/L80ng引物DNA和0.1μg连接DNA或0.1μg质粒。反应管在95℃变性5min,取出,稍离心,立即放入37℃C水浴保温2min使DNA退火,加入1UE.coli...

http://qihuangzhishu.com/969/515.htm

核酸(基因)探针目的核酸制备技术_《实用免疫细胞核酸》在线阅读_【中医宝典】

...即双链DNA先高温变性,然后在低温下引物退火,再在中等温度进行链延伸反应。上述在三种不同温度下变性退火和延伸为一个循环反应,重复这种循环反应可使DNA获得指数性倍增,例如经过35个循环反应,DNA可扩增1×108倍以上。...

http://zhongyibaodian.com/shiyongmianyixibaoyuhesuan/969-22-2.html

PCR技术原理_《实用免疫细胞核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...PCR是体外酶促合成特异DNA片段新方法,主要由高温变性低温退火和适温延伸三个步骤反复热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成寡核苷酸引物...

http://qihuangzhishu.com/969/571.htm

杂交前准备_《实用免疫细胞核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...吸头尖端使之形成一球团状(2~3min);(3)加入5.0ml 2mol/LNaOH。摇动小管使DNA悬浮溶解,将小管置50℃15min助溶;(4)用DEPC水将混合物稀释至175ml(总体积),充分混合,注意确保管内已无颗粒状;(5)...

http://qihuangzhishu.com/969/665.htm

聚合酶链反应_《医学遗传学基础》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...引物将待扩增DNA复性结合,然后聚合酶作用下,利用溶液中的核苷酸原料,不断延伸合成新互补链,这样,一条DNA双链就变成了两条双链。若继续按照变性(92-95℃)→复性(40-60℃)→引物延伸(65-72℃)顺序循环20至40个...

http://qihuangzhishu.com/956/142.htm

DNA限制性内切酶_《实用免疫细胞核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...噬菌体DNA进入细胞后被限制酶切成片段,片段数目DNA分子中限制酶识别点数目成正比,这些片段进一步被细胞核酸外切酶降解,就会开始裂解感染,由此产生子代噬菌体全部带有修饰过DNA,因此能以很高效率去感染另一些具有相同限制-修饰系统...

http://qihuangzhishu.com/969/616.htm

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