从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。
(一)测定方法分类 体液或组织中无机盐的测定一般可用以下几类方法进行。 ⒈原子吸收分光亮度法 测定Ca、Fe、Cu、Zn、Mg、P、Pb、Cd、Hg、Al和As可采用原子分光亮度法。以组织块为标本的检测更为适用。 ⒉火焰亮度法 测定Na、K、Ca、Li、Cs和Zn可采用火焰亮度法。该方法属于经典的标准参考法,优点是结果准确可靠。国内检测Na、K的火焰亮度计种...
引言中已强调了仅在一定条件下酶反应速度v才和酶量成正比例。一定条件是什么?这些条件之间有无主次关系?如何选择合适的测定条件?这些都是实验室工作者在设计或选择测酶活性浓度方法时必须面对的问题。 首先可从理论上探讨在什么特定情况下的反应速度才可能与酶量成正比例。酶的整个反应过程可简化如下: 式中Kp可看成为ES的解离常数.Michaclis和Menten通过推导...
... 氨基酸算起,已有150年的悠久历史,直到1955年,Sanger首次阐明胰岛素的氨基酸排列顺序,为研究蛋白质的一级结构开辟了道路。这在分子生物学的发展进程中是一个重要突破。目前关于核酸的一级结构研究,由于Sanger等发明了加减法,可以得到了突飞猛进的发展。对此之下,关于蛋白质的一级结构研究进展不如核酸迅速。但随着Edman液相自动顺序分析仪和固相顺序分析...
...mol /L高氯酸溶液,15分钟后,用4000r/min,离心10分钟,取上清液(如蛋白浓度过高,上清混浊,则要过滤至清)。 2.2 PEG测定 于4ml上清液中加入1.0ml5%BaCl2和0.5ml的0.1mol/L碘溶液,反应15分钟后,进行比色。记录各样品的A535值。 2.3 标准曲线的绘制 取≤1%蛋白质溶液,另入PEG合成10~80μg/ml ...
...下面将提到的另一类连续监测法相比较,最基本一点的是此类方法停止反应后才测底物或物的变化。很难进行连续监测,而另一类方法则不需停止酶反应,就可测定反应物的变化,很容易观察到反应的整个过程。后一类方法开始于50年代,Warburg首先用分光光度计。在340nm处直接监测到反应物NADH的动态变化过程。由于不停止酶反应,不需添加其它呈色试剂。测定方法简单,结果准确...
...,内含4% 牛血 清白蛋白,pH7.4。 1.4 抗-HBs参比标准品,含抗-HBs10~160mIU /ml。采用四点法 或五点法。 2 测定 先将检品按估计效价稀释成不同倍数,使其cpm计数落在参比标准品直线范围内。一般10%肌注丙种球蛋白可进行10、20、40倍稀释。乙型 肝炎 免疫球蛋白可进行500、1000、2000倍稀释。正式试验时根据预试结果调...
...%盐酸羟胺5ml,用双硫腙滴定液滴定,操作同上。 3 计算 0.050×2.04100 硫柳汞含量%(g/ml)=样品滴定数×────────×──────── 标准汞液滴定数 样品ml数×1000 0.050×1.58100 硫酸汞苯含量%(g/ml)=样品滴定数×────────×──────── 标准汞液滴定数 样品ml数×1000 附注 可做限度测定
...好后,立即用枸橼酸盐一氯化钠溶液分别作3个连续倍倍稀释,使最低和最高稀释度的凝结时间在17~35秒间(一般为1∶16~1∶256) 2.3 测定 2.3.1 第一步,混合物的保温 取7支玻璃凝集管放入冰浴中,每管加0.3ml混合试剂,然后于第1、2、3管分别加高、中、低稀释度的标准品各0.1ml,第4、5、6管分别加高、中、低稀释度的样品各0.1ml,第7管...
从广义上说,任何一种可以测定反应物变化速度的分析技术,不论是经典的比色法、容量法,还是现代的仪器分析技术都可用来测定酶活性浓度,但从历史和发展来看,主要还是使用分光亮度法和量气法。
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