(1)1mm厚组织块,在4 ℃ 下用固定液固定后,置于含4.5%的蔗糖PBS(0.05mol/l pH7.2),4 ℃ 中漂洗,换数次固定液,过夜。 (2)随后,作10~40μm的冰冻切片,放入第一抗体血清作用12~18h,4℃,用含蔗糖的PBS洗数次。 (3)置于HRP标记抗体液(第二抗体)4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜
金标法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质,使其与抗体相吸附,从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时,在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色,不需加外进行染色。在电镜水平,金颗粒具有很高的电子密度,清晰可辨。因此,免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面,并取得了要喜的进展...
【译文】 北朝则指的是元魏。元魏后来也分裂成东魏和西魏,西魏被宇文觉篡了位,建立了北周;东魏被高洋篡了位,建立了北齐。 【启示】 世界上最伟大的帝王,都是那些开创天下的帝王。至于那些继承祖业的皇帝,除了少数几个能在文治武功方面有特殊成就,其他多数总是平平凡凡。
...察。 免疫金银法敏感度高,金银颗粒电子密度高,反差强;应用包埋前染色可先定位阳性反应部位再作电镜超薄切片,获得阳性反应机率高,特别适用于含微量抗原的部位,如突触等。其不足是须经暗室显影,手续较烦杂,包埋前免疫染色易增加非特异性染色。另外,由于单个金粒周围结合的银粒不是固定的,受多种因素影响。因此,电镜免疫金粒染色法的金粒银粒计算不适于做半定量观察,误差较大。
...为性病病原体基因组或质粒DNA。探针以放射核素或非放射性核素标记,以利于杂交信号的检测。 所谓杂交(hydridization)指两个以上的分子因具有相近的化学结构和性质而在适宜的条件下形成杂交体(hybrid),杂交体中的分子不是来自一个二聚体分子。同一个二聚体中的两个分子在变性解离后重组合称为复性。利用两条不同来源的多核苷酸链之间的互补性而使它们形成杂交...
肥胖也是一种炎症吗?法国科学家日前提出了这一问题,因为他们在研究中发现,当肥胖症患者体重下降时,其皮下脂肪组织中炎症基因的表达会发生明显改变。 据法国媒体报道,法国国家健康与医学研究所的科学家最近对29名患有肥胖症的妇女采取了减少卡路里的食谱疗法以减轻其体重,并对17名体重正常的妇女进行了对比研究。在采取食谱疗法后的第28天,专家仔细观察了肥胖症患者皮下脂肪...
经固定组织、应用振动切片机(Vibratome)切35~50μm厚片,或用组织铺片,以漂浮法在反应板上进行下列步骤: (1)正常 羊血 清(1:30PBS稀释),室温孵育30min。 (2)第一抗体(A种动物抗血清),4℃湿盒中48~72h。 (3)羊抗A种动物血清(1:100)室温30min。 (4)A种动物血清PAP复合物(1:100)室温30min。 ...
为了得到更明确的染色结果,在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法,使IGS得到放大,这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。下面以5-羟色胺定位为例说明这一新方法。 (1)石蜡切片→脱蜡至水。 (2)1%胰蛋白酶消化10min或3mon/L尿素消化30min。 (3)0.05mol/l pH7.4 TBS振洗5'×2。 (4)1%EA封闭组织10mi...
标记过多或过少荧光素的抗体分子可用DEAE-纤维素柱层析法除去。方法如下: DEAE-纤维素柱的装柱,洗脱、再生方法等与提纯IgG方法相同。装柱所需DEAE-纤维素量以干重每克交换20~50mg标记蛋白量为宜。常用梯度洗脱法如下: (1)层析柱用0.01mol/L、pH7.2PB平衡,标记物上柱后,先用0.01mol/L、pH7.2PB洗脱,洗出无色或淡绿色...
角膜、结膜上皮损伤或有 溃疡 时,可被荧光素染色,方法是点无菌的1%荧光素液于结膜囊内,然后用生理盐水冲洗,亦可用 玻璃 棒蘸少量药液于结膜囊内,进行观察。此时可见角膜、结膜破损处有嫩绿色着色,上皮完整处不染色。如有 角膜瘘 ,点荧光素后作轻压眼球,可见角膜表面布满黄绿色荧光素,而在瘘管处则有液体流出,状如清泉外流。操作时注意勿污染被检者面部及衣服。由于荧光...
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