1.葡聚糖凝胶的某些技术数 据 种类 干颗粒直径(μ) 分子量分级范围 床体积毫升/克干分子筛 得水值 溶胀最少平衡时间(h) 柱头压力(kPa)(2.5cm直径柱) 肽及球形蛋白质 葡聚糖(线性分子) 室温 沸水浴 Sephadex G-10 40~ 120 ~700 ~700 2~ 3 1.0±0.1 3 1 Sephadex G-10 40~ 120 ...
抗原 与 抗体 成分的一种定性与半定量分析方法,通常采用半固态透明 琼脂 凝胶 作为支持介质。置于孔中的抗原和抗体相向扩散,在两者浓度比例适当处相遇后如能结合形成 复合物 则形成沉淀线。分为 单向扩散 (single immunodiffusion)、放射状扩散(radial immunodiffusion)和双向扩散(double immunodiffus
原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数小时内完成。 作用把含某种多肽或蛋白的cDNA片段的质粒,按照第十九章 在光照下标记光敏生物素,然后经DNA酶消化1h,得到...
...糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。其中氨基聚糖可分为透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫 酸角 质素、肝素和硫酸乙酰肝素等。 真皮纤维化是以胶原为主的细胞外基质成分在真皮中过度 积聚 的结果。它既见于 硬皮病 等皮肤病中,还见于皮肤 创伤 愈合过程中发生的肥厚性瘢痕和 瘢痕疙瘩 中。现将免疫细胞化学技术在上述常见的真皮纤维化性疾病研究中的应用简介如下:
自Gall和Pardue建立了原位杂交技术以来近20余年内,这一技术为基因的定位和表达、基因进化、发育生物学、肿瘤学、微生物学、病毒学、医学遗传学和遗传分析等领域研究提供了极其宝贵的资料,发挥了其它技术难以取代的作用。近年来,此一技术的应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高...
1.原理常规的G带显带技术,在 人类 染色体中仅观察到320~450条带纹,对于一些染色体细微结构异常的识别是不够的。 氨甲碟呤抑制二氢叶酸还原酶,阻止叶酸转变为四氢叶酸,从而干扰了脱氧胸腺嘧啶核苷酸的合成,阻止了DNA的复制,使细胞被阻止在S期内。胸腺嘧啶核苷解除氨甲喋呤的作用,让被阻滞的细胞同时开始进行DNA复制,进而同步分裂;放线菌素D可增加染色体的长...
蛋白质在碱性条件下带不同量的负电荷,在电场中由阴极向阳极泳动。醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶是目前最常采用的两大介质。由于白蛋白等电点的差异,电泳后由正极到负极可分为,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五个区带,血清蛋白电泳初步了解血清白蛋白中主要组分的一种技术方法,通过血清蛋白电泳来反映肝细胞损伤程度和病变范围。也可用于反映其他疾病如肾脏疾病...
蛋白质在碱性条件下带不同量的负电荷,在电场中由阴极向阳极泳动。醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶是目前最常采用的两大介质。由于白蛋白等电点的差异,电泳后由正极到负极可分为,白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白五个区带,血清蛋白电泳初步了解血清白蛋白中主要组分的一种技术方法,通过血清蛋白电泳来反映肝细胞损伤程度和病变范围。也可用于反映其他疾病如肾脏疾病...
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外,又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
(一) 醋酸纤维素 薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的 羟基 乙酰 化形成的纤维素 醋酸 酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对 蛋白质 样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的 缓冲液 也少,电泳时电流的大部分由样品 传导 ,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5μg的蛋白质可得到满意的分离...
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