（一）基本原理 应用DNA探针缺口翻译（nick translation）方法，通过碱基配对以一条DNA链为模板，将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种：一种是用HRP显示，类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法，利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
由于DNA提取方法的改善和DNA质量的提高，几乎所有基因分析的技术均可用于石蜡包埋组织，但目前分子 病理学 研究的常用方法是点杂交、Southern印迹杂交和多聚酶链反应（PCR）。 1．点杂交 鉴于包埋组织DNA有一定程度的降解，因而点杂交被认为是一种简便、快速和实用的方法，特别适用于较大样本的筛选。Dyall – smith等（1988）采用未经抽提的蛋...
从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断的先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净，又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中，SDS是离子型表面活性剂，主要作用是：（1）溶解膜蛋白而不破坏细胞膜；（2）解聚细胞中的核蛋白；（3）与蛋白质结合，使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...
...指南，第二版，北京：科学出版社。1992 2.ThKohler ,D Labner,AK Rost ,et al.Quantiattion of mRNA by Polymerase ChainReaction (Nonradioactive PCRMethods ),Springer Lab Manual,1995 3.NaohikoSakai,Silvi...
...的排列顺序，这种特定的排列顺序不是随机的，而是严格按照蛋白质的编码 基因 中的 碱基 排列顺序决定的。基因的 遗传信息 在 转录 过程中从 DNA 转移到mRNA，再由mRNA将这种遗传信息表达为蛋白质中氨基酸顺序的过程叫做翻译。翻译的过程也就是蛋白质分子 生物合成 的过程，在此过程中需要200多种 生物 大分子参加，其中包括 核糖体 、mRNA、tRNA及...
国际著名学术杂志《自然综述-药物发现》在线杂志今年一月份发表美国南加利福尼亚大学生化和分子生物学Christine B. Yoo博士和Peter A. Jones教授的文章，介绍了癌症表观遗传治疗的研究动态，引起了该领域许多学者的关注。 两位学者指出，癌症的发生与进展是由遗传和表观遗传事件控制的。与遗传改变几乎是不可能逆转的不同，表观遗传异常是有可能逆转的，...
外源DNA片段末端的性质，以及质粒载体和外源DNA上限制酶切位点的性质决定了质粒或噬菌体与外源DNA连接反应的不同策略。 （一）外源DNA带有非互补突出端的片段 用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA，可以产生带非互补突出端的片段，这是最容易连接的片段，如图24-1所示。 将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌，然后在含有AP等抗生...
...体免受乙型肝炎病毒感染。注射 乙肝 疫苗后,体内可产生抗hbs。 hbeag(+)是乙肝病毒在体内复制(繁殖)的指标,提示传染性较强,hbvdna的临床意义与其相同。抗hbe是hbeag的抗体,它的出现表明传染性较低,病毒在体内不活跃。 hbcag是乙型肝炎病毒的核心抗原,一般存在于肝细胞内,只能通过特殊的方法才能检测到,因此乙肝五项指标中不包括此项。但只要...
一、DNA探针的应用
组成人体 蛋白质 的 氨基酸 中，有些氨基酸只能在植物及 微生物 体内合成，人体必须从食物中摄取，这些氨基酸即 必需氨基酸 (escential amino acids)，其余的氨基酸可利用 代谢 中间产物合成，称为 非必需氨基酸 (nonescential amino acids)。(表7-2)除 酪氨酸 外，体内非必需氨基酸由四种共同代谢中间产物( 丙酮...
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