出处:中国中西医结合杂志 1994;14(6):334~336 摘要:本研究应用流式细胞仪和单克隆抗体技术测定了73例卵巢肿瘤患者外周血T淋巴细胞 亚群,试图阐明卵巢肿瘤患者各证型之间的免疫状况。结果显示:卵巢肿瘤患者外周血T细胞亚群变化与辨证分型有关,可作为临床判断虚证、实证及其免疫状况的敏感指标,为中医治疗卵巢肿瘤提供了客观依据。 讨论 自Hoffman...
序列位置标签 (Sequence Tagged Site, STS):一段短的DNA序列(200-500个 碱基对 ),这种序列在 染色体 上只出现一次,其位置和 碱基顺序 都是已知的。在PCR反应中可以检测处STS来,STS适宜于作为人类基因组的一种地标,据此可以判定DNA的方向和特定序列的相对位置。ETS是cDNA上的STS。
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA变性,解离成单链,迅置于冰上冷却。然后置于37℃~42℃杂交过夜。(2)RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景,因此,在操作步骤...
亚克隆 :(subclone) 分为 分子克隆 和 细胞 克隆 对培养的细胞来说,从原有的克隆中,再筛选出具有某种特性的细胞进行培养,就是亚克隆subclone。 在分子克隆中,从大片段的克隆中选取特定小片段 再克 隆,也叫subclone。 就是初步克隆的外源片段往往较长,含有许多目的 基因 片段以外的DNA片段,将目的基因所对应的一小段DNA找出来。 对...
此法是在亚硫酸盐催化下,生物素酰肼可置换寡核苷酸探针中胞嘧啶上的氨基,使生物素结合到DNA分子上而制成生物素化DNA探针。此法优点是采用通用试剂和技术,检出敏感。Vicied 等人指出DNA和RNA中胞嘧啶N-4位置在亚硫酸氢盐存在下可用乙二胺连接臂修饰,此过程也可能介导C-6位的磺酸盐组分。在合适的条件下,可有3%~4%的碱基被修饰。新鲜配制亚硫酸氢钠-乙...
克隆载体 (Cloning Vector):通常采用从 病毒 、 质粒 或高等生物 细胞 中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将 重组 后的载体引入到 宿主 细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒, 噬菌粒 , 酵母 人工 染色体 。 对载体的要求:①能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要...
序列标志 位点 (Sequence Tagged Sites,STS) STS是对以特定对 引物 序进行PCR特异 扩增 的一类 分子 标记的统称。通过设计特定的引物,使其与 基因组 DNA序列中特定结合位点结合,从而可用来扩增基因组中特定区域,分析其 多态性 。利用特异PCR技术的最大优点是它产生信息非常可靠,而不像RFLP和RAPD那样存在某种模糊性
ARS(autonomously replicating sequence)。在 真核生物 中发现的一类能启动DNA复制的序列,含有一个AT富集区。最早在 酵母 中分离得到,随后在其它真核生物中也发现了ARS序列的存在。
DNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下,将游离的四种脱氧单核苷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP,简写为dNTP)聚合成DNA的过程。 这是一个非常复杂的酶促反应,需要许多种酶和蛋白质参与,现分别叙述它们在DNA复制中作用。
...的山葛[P.montana(Lour.)Merr.]在分种界限及亲缘关系上一直存在争议,而山葛则不能作为 葛根 入药。转录间隔区(ITS区)序列进化速度较快,其速度恰与近缘种进化较一致,因此被广泛用于高等植物近缘种的鉴别。 北京军区总医院药理科通过对rDNA-ITS序列差异分析,探讨中药 葛根 及其近缘种的分类地位及系统发育关系,为葛根的指纹图谱鉴别提供分子...
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