...表型由于IEF法需大型设备,工作量较大,极大地限制了该法的临床应用。免疫印迹法为目前检测ApoE表型最常用方法。此法直接用血清(或血浆)作为样品,脱脂后进行IEF电泳,然后用特异性多克隆或单克隆抗体进行免疫印迹反应,根据黑色后图谱即可确定...
...DNA复制的研究最初是在原核生物中进行的,有些原核生物的DNA复制已经搞得很清楚。真核生物比原核生物复杂得多,但DNA复制的基本过程还是相似的。在这里我们主要讨论一些重要的区别。图16-16 端粒酶催化端区TG链的合成1.与原核生物不同,...
...单、双链DNA或RNA都可以作为PCR的样品。若起始材料是RNA,须先通过逆转录得到第一条cDNA。虽然PCR可以仅用极微量的样品,甚至是来自单一细胞的DNA,但为了保证反应的特异性,还应用ng级的克隆DNA,μg水平的单拷贝染色体DNA...
...近日,深圳市人民医院两位博士成功克隆出“激肽释放酶基因”,这种基因对高血压 高血压治疗具有重大意义。 这种新克隆出的中国人组织激肽释放酶基因经权威机构上海Sangon生物工程公司测序分析表明,其基因序列与国际报道的基因序列完全一致。我国在...
...(路透社医学新闻)据7月9日出版的《循环》杂志网络版报道,与其他类型的卒中患者或健康人相比,动脉粥样硬化性卒中病人中较常见到强毒株型幽门螺杆菌感染。 以往的报道已经显示,这些被称作细胞毒素相关性基因a(caga)阳性菌株的幽门螺杆菌类型与...
...(DNa polymerase)的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物(primer)的3’-OH上,释放出一个焦磷酸分子(ppi),如下式表示。聚合酶主要有以下几种:1.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶(E.ColiDNA ...
...Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测,DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开,然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链,这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制...
...DNA变性是指双螺旋之间氢键断裂,双螺旋解开,形成单链无规则线团,因而发生性质改变(如粘度下降,沉降速度增加,浮力上升,紫外吸收增加等),称为DNA变性。加热、改变DNA溶液的pH、或受有机溶剂(如乙醇、尿素、甲酰胺及丙酰胺等)等理化因素...
...(一)DNA的酶切与连接(1)酶切反应同质粒DNA的鉴定,只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切,则成比例增加。(2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。(3)15000rpm离心...
...HL活性不需要ApoC-Ⅱ作为激活剂;②SDS可抑制HL活性,而不受高盐及鱼精蛋白抑制;③主要作用于小颗粒脂蛋白,如VLDL残粒,HDL同时又调节胆固醇从周围组织转运到肝,使肝内的VLDL转化为LDL。经人及鼠cDNA克隆的DNA序列探明...
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