胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
1．用途：无脂蛋白血清（lipoprotein deficient serum,LPDS）主要用于LDL受体活性测定的细胞培养。 2．操作：常规采血，室温放置1～2h，以3kr/min离心10min，分离得到血清。向血清中按每1ml加0.33496g KBr，使其血清密度为d=1.215，或者按等体积加d=1.215的KBr液，按前述两方法铺在血清上面，按4...
一、目的要求 1．正确理解统计研究的三个基本步骤一搜集资料、整理资料、分析资料—和它们之间的关系。 2．学会拟制调查表，整理表的统计表的基本原则和方法。 3．重点学会如何对原始资料进行整理，并正确绘制图表。 二、内容、步骤 1．按下题要求自制调查卡片一份 某医师想观察胎盘娩出方式与人工 流产 史的关系，须要统计项目是人工流产史（流产胎次）和胎盘娩出方式（包括...
利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），这类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...
（一）抗体的制备 这是免疫细胞化学技术的首要试剂，必需制备具有很高特异性和敏感性的高效价抗体，这将在本书第二章 中详述。目前国内外市场各种特异性抗体日益增多，许多实验室直接应用市售产品，现在我国自制抗体种类少，发展抗体生产十分必要。尤其要定位一种新的抗原物质，能够自制较好。 （二）抗体的配制 包括抗体贮存液和抗体使用液的配制方法。新制备或购进的是原液或冻干品...
...组织成分了生非特异结合。 在HRP标记抗体中，常用的偶联剂有戊二醛、过碘酸钠及Maleimide等，现简介如下。 1．戊二 醛标记法戊二醛为制备各种酶标抗体最常用的偶联剂。市售戊二醛往往含有戊二酸、丙烯释及戊二醛自身聚合本等杂质，故需纯化后使用。戊二醛的纯度用含杂质的二醛的单体戊二醛的OD比值表示，它们的最大吸收光波长分别为235nm 和280nm，二者的O...
...白质的结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定，效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率（F/P）的测定和计算的基本方法是：将制备的荧光抗体稀释至A 280 1≈1.0，分别测读A 280 （蛋白质特异吸收峰）和标记荧光素的特异吸收峰，按公式计算。 F/P值越高，说明抗体分子上结合的荧光素越多，反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P＝1...
颗粒性抗原主要是指细胞抗原或细菌抗原。最常用的细胞抗原为制备溶血素用的绵羊红细胞。这种抗原制备比较简单，采集新鲜绵羊红细胞，以无菌盐水洗涤3次（每次离心2000r/min10min），最后配成10 6 /ml浓度的细胞悬液，即可应用。细菌抗原多用液体或固体培养物经集菌后处理。H抗原用有动力的菌株，菌液用0.3％～0.5％甲醛处理，而O抗原则需要100℃加温2...
一、ApoAⅠ ApoAⅠ是HDL的主要蛋白，占HDL总蛋白的70%。1989年由美国Breslow实验室首先将编码 人类 ApoAⅠ的基因分别整合到小鼠及大鼠的基因组内。ApoAⅠ在小鼠和大鼠体内的增强表达选择性地升高了血浆HDL胆固醇（HDL-C）水平。这项观察与人群研究结果一致，表明血浆ApoAⅠ浓度与HDL-C水平正相关，同时也提示可以采用升高血浆A...
...％ 葡萄 糖盐水，三天后仍可采血200～300ml。动物休息一周，再加强免疫一次，又可采血二次。如此，一只羊可获1500～2000ml血液。小鼠取血往往采取断尾或摘除眼球法，每鼠得血一般不超过2ml。 抗血清的分离多采用室温自然凝固，然后放置37℃或4℃待凝块收缩。前者迅速，但得血清较少；后者时间长，有时还会出现溶血，但获得血清多，而且效价不会下跌。 抗血清...
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