...的打点法。（二）DNA的吸印转移法（Southern Blot）DNA经过限制性内切酶消化和凝胶电泳后，放入碱性溶液中使其变性，将变性后的单链DNA从凝胶中按原来位置和顺序用滤纸吸印转移到硝酸纤维膜上，然后再与标记探针杂交。此方法比较准确地...
...，指标记DNA结合到空白膜上的放射性计数，即本底。这个问题的克服一是使用高纯度的核酸制品和充分严格的杂交条件：二是选择合适的杂交反应液和对膜进行处理。研究发现，随着离子强度的增加，空白膜（未固定DNA对照膜）上的“噪音”水平增加，而在50%...
...阴性。②染色抑制试验（一步法）：将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白或血清（相同）等量混合，如上法处理切片。结果应为阴性。为证明此种染色抑制不是由于荧光抗体被稀释所致，可用盐水代替未标记抗血清，染色结果应为阳性。此法结果较二步法稳定。③类属抗原染色...
...PBS固定5min 。（6）PBS冲洗2×3min。（7）0.25%乙酸酐（0.1mol/L 三乙醇胺配）10min。（8）2×SSC冲洗10min。（9）杂交：如是cDNA探针用前需进行变性处理，载片法时将切片在空气中晾干，加含探针的杂交...
...限制性片段长度的多肽现象等。二、DNA限制性片段多态性连锁分析DNA限制性片段长度多态性（restricitionfragment length polymorphism, RFLPs）连锁分析法是指由于缺失、重排或碱基置换的结果，使DNA...
...切成二条单链的双链DNA。因此，反转录酶可用来把任何基因的mRNA反转录成cDNA拷贝，然后可大量扩增插入载体后的cDNA。也可用来标记cDNA作为放射性的分子探针。...
...，敏感性较差（图3-2）。图3-2 直接法2．检查抗体法 将抗原标记上荧光素，即为荧光抗原，用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应，而将抗体定位检测出来。二、间接法1．检查抗体法（夹心法）此法是先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应，再用此...
...在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法：1．一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合（A+B），按直接法进行染色。2．二步法双染色 先用RB...
...显影法用于DNA断裂的定性分析。这种方法比广泛使用的溴乙啡啶染色法效果好，可增加检测凋亡DNA的敏感性。原位凋亡的检测则使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿苷-生物素缺口末端标记的组织病理染色法。 Vijayan博士等发现：在安慰剂...
...患者在年幼时死亡。这时采取两种方法，一是少数的大家系，并从此家系成员中获得DNA信息，其优点是所有患者都是一个遗传病，并由单一基因突变引起；二是收集大量的小家系。前者如慢性进行性舞蹈病，后者如囊性纤维化（CF）。实际上，人们希望能发现连锁需在...
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