核酸外切酶 (exonuclease)在 核酸 水解酶 中,是具有从 分子 链的末端顺次水解 磷酸二酯键 而生成单 核苷酸 作用的酶,与 核酸内切酶 相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的3′端生成5′- 单核苷酸 的酶,及水解5′端生成3′-单核苷酸的酶。前者有 蛇毒磷酸二酯酶 及 大肠杆菌核酸外切酶 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等;后者有 脾脏 磷酸二酯酶 、 嗜酸乳杆菌 (...
核酸外切酶 (exonuclease)在 核酸 水解酶 中,是具有从 分子 链的末端顺次水解 磷酸二酯键 而生成单 核苷酸 作用的酶,与 核酸内切酶 相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的3′端生成5′- 单核苷酸 的酶,及水解5′端生成3′-单核苷酸的酶。前者有 蛇毒磷酸二酯酶 及 大肠杆菌核酸外切酶 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等;后者有 脾脏 磷酸二酯酶 、 嗜酸乳杆菌 (...
将从 病毒 毒粒或 病毒感染 的 细胞 抽提分离的病毒 核酸 实验性地导入细胞,若都启动 病毒复制 循环,产生 子代 毒粒,此种病毒核酸称为 感染性核酸 ,否则称为非感染性核酸。 感染性核酸 (infectious nucleic acid)是由病毒 质粒 (或者 感染 细胞)中所分离出的具有 感染性 的核酸。通常,它的 感染率 远比完整病毒质粒为低,但感染...
...ISH)的应用在细胞培养和染色体铺片(见二十一章 )中较为广泛。FISH属于非放射性标记,其优点在于简便,快速,其敏感性可与放射性同位素标记核酸探针相等。不少实验室报告应用FISH(2~5kbp探针)可成功地达到单个拷贝(copy)的特异性定位。 2.荧光标记DNA探针应用于ISHH中的基本原则(Barbara Traok和Dan Pinkel 1990) ...
在进行任何一项调查研究时均有其调查的目的。例如1988年1月在S市骤然发生 甲型病毒性肝炎 (甲肝)爆发流行,在短短的二个月内报告病例数达30余万。疫情之猖獗、危害之深重在国内医学史上从未有之。面临新的疫情,我们应开展调查研究,其目的欲了解它的可能病因是什么?通过什么传播媒介能使这么多人感染等?要解决这些问题仅凭个人的经验是难以解决的,必须借助他人的经验,即...
核酸是生物体内的高分子化合物,包括DNA和RNA两大类。
...失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶K消化过程中通常加入EDTA(以抑制依赖于Mg 2+ 的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶K具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l Ca 2+ 而不含EDTA的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGT(pH8.0)至终浓度为2mmol/L...
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ,是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型,将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成, 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基,RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
核酸内切酶 (endonuclease)在 核酸 水解酶 中,为可水解 分子 链内部 磷酸二酯键 生成 寡核苷酸 的酶,与 核酸外切酶 相对应。从对 底物 的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶; 脾脏 RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶。如链孢霉(Neurospora)的 核酸酶 就是既分解DNA又分解RNA的酶。一般来...
...提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此,寡核苷酸探针的研究,对于提高核酸杂交技术的特异性和敏感性,扩大应用范围有重要意义。 常用的寡核苷酸探针有3种:①特定序列的单一寡核苷酸探针;②较短的简并性较高的成套寡核苷酸探针;③较长而简并性较低的成套寡核苷酸探针。多用 32 P标记寡核苷酸探针,...
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