.../μl。作者在英皇家研究生院Polak教授实验室应用于放射性标记cRNA探针的浓度为0.5ng/μl,而在非放射性标记(生物素或地高辛)cRNA探针浓度为2.5ng/μl,放射性标记DNA探针浓度为1.0ng/μl。向正华等应用地高辛标记...
... 近年来,用聚合酶链反应(PCR)及DNA探针技术检测黑热病取得较好的效果,敏感性、特异性高,但操作较复杂,目前未能普遍推广。...
...为HPV感染的特征性改变;基底细胞增生,真皮水肿,毛细血管扩张,周围有慢性炎细胞浸润。 聚合酶链反应(PCR) PCR方法简便、快速、敏感性高,特异性强。可检测极微量HPV DNA,不仅可确诊是否为HPV感染,且能确定HPV类型。注意取新鲜...
...一、直接诊断和间接诊断基因诊断可分为两类:一类是直接检查致病基因本身的异常。它通常使用基因本身或紧邻的DNA序列作为探针,或通过PCR扩增产物,以探查基因无突变、缺失等异常及其性质,这称为直接基因诊断,它适用已知基因异常的疾病;另一类是...
...23-8比较了用两种探针进行印迹杂交后,出现杂交带的长度和数目。根据计算,如果只用一种探针,则A个体DNA所呈现的杂交带型,同样出现在B个体DNA中的概率为3×10-11。如果同时用两种探针进行比较,则两个个体完全相同的概率小于5×10-...
...DNA液混合于980μl水中,混匀后测定,吸收值乘以50即为DNA浓度(μg/ml);(8)制备好的DNA液储于-20℃备用,用前取出冻融后煮沸。二、关于探针的标记(一)cRNA探针的同位素标记1.标记液(转录标记)2.转录缓冲液※:用地高辛...
...及α-32P标记混合),12.μg变性鲱鱼精子DNA,最终体积50μl。(五)模板单、双链DNA或RNA都可以作为PCR的样品。若起始材料是RNA,须先通过逆转录得到第一条cDNA。虽然PCR可以仅用极微量的样品,甚至是来自单一细胞的DNA...
...与转化细胞的DNA进行分子杂交,可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上,用碱裂菌,菌落释放的DNA就吸附在膜上,再与标记的核酸探针温育杂交,核酸探针就结合在含有目的序列的菌落DNA上而不被洗脱。核酸...
...23-8比较了用两种探针进行印迹杂交后,出现杂交带的长度和数目。根据计算,如果只用一种探针,则A个体DNA所呈现的杂交带型,同样出现在B个体DNA中的概率为3×10-11。如果同时用两种探针进行比较,则两个个体完全相同的概率小于5×10-...
...许多疾病的遗传异质性,以及多数遗传的基因异常尚属未知,目前能直接诊断的病种虽日益增多,但仍然是比较有限的。表13-2 遗传的基因诊断方法基因异常方法探针、引物或限制酶基因缺失基因组DNA印迹杂交 PCR扩增缺失基因的探针 引物包括缺失或在...
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