...15~45min 。(11)杂交:将载片上过量的甲酰胺液倾去,加20μl杂交混合液(含放射性同位素标记的探针量为5×103~106cpm/每张载片)。覆以硅化的盖玻片,置于盛有少量5×SSC的硬塑料盒内以保持湿度,42℃孵育12~18h。为...
...寡核苷酸探针;从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是,这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。...
...通过适当厚度的铅屏蔽,将99mTc 发射的能量为141ke V的γ射线减弱后,测定99Mo发射的能量为739Kev的γ射线。2.放射化学纯度及放化纯度鉴定(1)放射化学纯度:放射性核素标记化合物都是以一定的化学形态存在的,所以:放射化学纯度...
...可以采用不同的诊断方法(表13-2)。如基因缺失可用基因探针杂交,PCR扩增直接检测;点突变可用等位基因特异的ASO探针、SSCP等直接检查。一般无需对家系成员进行分析。但条件是必需知道基因异常的性质,并肯定该异常与疾病之间的关系。然而,由于...
...10 镰状贫血的基因诊断除MstⅡ外,限制酶DdeⅠ(识别序列为CTNAG)也能够把正常的βA基因与镰变了的βS基因区别开来,并用于诊断。2)ASO探针诊断:由于突变部位和性质已完全明了,也可以合成寡核苷酸探针,用32P标化来进行诊断。此时...
...以DNA为模板合成RNA是生物界RNA合成的主要方式,但有些生物像某些病毒,噬菌体它们的遗传信息贮存在RNA分子中,当它们进入宿细胞后,靠复制而传代,它们在RNA指导的RNA聚合酶催化下合成RNA分子,当以RNA模板时,在RNA复制酶作用...
...。三、凝集素在免疫细胞化学中的应用凝集素可为荧光素、酶和生物素等所标记,分别进行下列染色法:1.直接法 标记物直接标记在凝集素上,使之直接与切片中的相应糖蛋白或糖脂相结合。(1)切片脱蜡至水。(2)凝集素标记物(100μg/ml),室温,...
...临床上遇到血清抗HCV阴性,而HCV RNA阳性的情况时,应考虑以下几种可能: (1)急性丙型肝炎的早期:这时虽有病毒血症,HCV RNA阳性,但血清抗HCV常没有出现或滴度低,血清抗HCV检测为阴性。 (2)免疫应答功能低下的人感染丙肝...
...通过检测病原体遗传物质来确认病原体也许是检查病原体为直接的方法了。目前比较成熟的技术包括基因探针技术和PCR技术。(一)基因探针技术用标记物标记细菌染色体或质粒DNA上的特异性片段制备成细菌探针,待检标本经过短时间培养后,经过点膜、裂解...
...细胞杂交体中提取的DNA。如果人体某种载脂蛋白cDNA或基因DNA探针仅与含有特定人体染色体的体细胞杂交体DNA杂交,且不与同一杂交体内非人体染色体DNA交叉反应,这种载脂蛋白基因的染色体定位便可初步确立。荧光标记原位杂交法使用荧光素标记的...
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