核酸 存在于多种 细胞 ,如 病毒 、 细菌 、 寄生虫 、动植物细胞;多种 标本 中,如 血液 、组织、 唾液 、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种 DNA 、 RNA 的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与 纯化 是在溶解细胞的基础上,利用 苯酚 等有机溶剂...
1.光敏生物素标记核酸 目前使用的光标生物素试剂有两种:光生物素(乙酸盐)和 补骨脂 素生物素。它们都是由一个光敏基团、一个连接臂和一个生物素基团组成。光生物素的光敏基团是-N3,它在光作用下可与核酸中的碱基结合。 补骨脂 素生物素中的光敏基团补骨脂素在光照(320~400μm)下,可与单链或双链核酸发生反应,反应主要在T上,C上也有一定程度的反应。光敏生物...
放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微,反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物,但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的(B)和游离的(F)抗原,所以,B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节 。根据抗原—抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同,可采取各种分离技术。
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ,是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型,将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成, 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基,RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
肽核酸结构。 肽核酸 ( Peptide nucleic acid ; PNA )是一种与 DNA 和 RNA 相似的 化学 物质,可经由人工合成制造,用来作为 生物学 研究或是医学治疗。地球上已知的生物并未发现任何体内拥有PNA的个体。 PNA的骨架是由重复排列的N-2-(氨乙基)- 甘氨酸 (N-(2-aminoethyl)-glycine)单位,经由 ...
中药理化鉴定 理化鉴定是用物理的或化学的方法,对中药材及其制剂所含的有效成分、主成分或特征性成分进行定性、定量分析,以鉴定真伪、评价品质。 对于化学成分不清楚,或因次要成分的干扰而无法进行主成分分析时,可选用一些特殊的色谱、波谱峰进行鉴定和识别。 常用的理化鉴定方法主要有定性反应、色谱法和波谱法。 (1)颜色或沉淀反应 各类成分因结构或功能团的不同,常与某些...
锁核酸 ( Locked nucleic acid , LNA )是一种经过修饰的 RNA ,LNA中一部分 核糖 上的2'与4'碳连结在一起。一般可见于A- DNA 或RNA。 这类 核酸 可以增加 引子 或 探针 (probe)的 融解 温度(Tm值),加强这些实验用物质的稳定性,可应用在即时 聚合酶连锁反应 (real-time PCR)等技术中。 参...
核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内,常与蛋白质结合形成核蛋白。 众所周知,核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内,常与蛋白质结合形成核蛋白。 美国科学家经过20多年的研究工作得出结论:细胞的健康有赖于核酸的健康,如果核酸充足、健康,就能有效地抵抗衰老,延长人的寿命。一些人之所以提...
...口处会形成3’—羟基末端,这时再在大肠杆菌DNA聚合酶I的催化下将核苷酸残基加在3’-羟基上,同时,根据大肠杆菌酶DNA聚合酶I的5’→3’核酸外切酶活性,此酶将缺口5’侧核苷酸依次切除。其结果是在缺口平移(nick tr-anslation)。根据这个原理,如果用高强度的放射性核苷酸(通常为α-32PdATP)置换先前存在的核苷酸,则可制备比活性高达108...
放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微,反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物,但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的(B)和游离的(F)抗原,所以,B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节 。根据抗原—抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同,可采取各种分离技术。
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