自1969年以来，我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针；从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是，这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
...的结构和金属性质。在1939年Kausche和Ruska把 烟草 花叶 病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察见金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于免疫组织化学研究是在1971年，Faulk 和Taylor首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合，用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原。此后，他们还把胶体金与抗胶原血清，植物血凝素，卵白蛋白...
...不同观察者之间有差别，但经过训练和有较多的观察经验后，这种方法基本上是可靠的，也便于推广应用。 近年使用荧光显微分光光度计和图像分析仪等定量检测方法，结果比较客观，将结果打印报告更适合于临床诊断和科学研究，应争取采用这些先进仪器和方法，改进结果的判断，记录和报告。 5．免疫酶组织化学检测自身抗体方法免疫酶组织化学间接法可以代替免疫荧光法用于自身抗体的检测，但...
通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒，也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法，是在90年代才开展起来的多聚酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便，在我国发展很快。目前，PCR技术结合分子生物学实验技术（如逆转录反应杂交技术等）开发了许多PCR新技术（reverse tran...
（一）光敏生物素标记cRNA探针的应用 以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针，使其最终浓度为0.5～1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素（1μg/μl）混合。在150瓦卤素灯下，距离光源20cm处照射30min。用仲丁醇抽提游离生物素，再用丁醇沉淀回收光敏生物素cRNA探针，将其溶于适量的灭菌双蒸水，用紫外分光...
自1969年以来，我们高兴的看到原位杂交免疫细胞化学技术已从分子生物学的一个分支发展成为生命科学的有效的研究方法。在原位杂交免疫细胞化学发展过程中两个关键性的突破是核酸探针制备的标记物的改进。核酸探针由克隆的核酸探针发展到无克隆的合成的寡核苷酸探针；从放射性同位素标记到非放射性标记。令人可喜的是，这一技术还处于不断的改进和更新的过程中。
...HAT选择培养液维持7～10天后应换用HT培养液，再维持2周，改用一般培养液。在上述选择培养期间，杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时，即可开始检测特异性抗体，筛选出所需要的杂交瘤细胞系。在选择培养期间，一般每2～3天换一半培养液。 2．抗体的检测 检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同，选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。 常...
...中具有诊断和鉴别诊断意义，寻常性 天疱疮 具有 鳞状上皮 细胞间隙抗体，类天疱疮具有基底膜带抗体。这种自身抗体无种属特异性。用直接免疫荧光法检测皮肤活检组织，间接法可用以检测病 人血 清中的抗皮肤成分抗体。 1．抗原切片直接法免疫荧光细胞化学检查，可以取病人皮肤活检组织作冰冻切片。 间接法检查常用大白鼠，豚鼠的食道上1/3部分作冰冻切片。也有人曾用猴、人、小...
...为结构参量和功能参量两大类。结构参量主要用于描述细胞的化学组分和形态特征；功能参量主要是描述细胞整体的理化和生物特性。这些参量有的需要经荧光标记方可测定，有的并不需要荧光标记。DNA以及RNA的含量，蛋白总含量、胞内pH值和细胞大小等为结构参数；细胞周期动力学、特殊配体的鉴定、特殊细胞的生物活性等则为功能参数。 1．DNA和RNA的测量和分析 DNA和RNA...
抗横纹肌自身抗体出现在50%以上的肌 无力 症和 胸腺瘤 病人，正常人未发现。属IgG类抗体，用间接免疫荧光法检测此抗体，准确简便。 1．抗原切片取人或大白 鼠骨 骼肌，沿肌纤维平行方向作冰冻切片，不固定。 2．间接法免疫荧光染色方法染色的方法步骤与其他自身抗体间接法相同，但在荧光抗体染色之后，要延长PBS洗涤时间，3次PBS洗涤，每次30min。封裱切片。...
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