...整合于染色体上也可出现在质粒DNA中,而后者居多,称之为产青毒素酶质粒,质粒有二种,大小分别为7.4kb和5.3kb。Pescador1998年设计一特异的检测淋球菌编码β-内酰胺酶基因的探针,采用酶化学发光法标记,液相杂交,用测光计测是特异...
...感染诊断。三、DNA探针已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。四、聚合酶链式反应(PCR)(一)标本的采集及处理采集的标本包括患者的血液、尿,以及腺体组织等。由全血制备的血沉...
...在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时,要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用...
...ACTCAA-AAGAATTGACGGGGGCCCGCACAa3′(30mer),衣原体16Sr RNA基因中的位点为909-938,与PCR扩增片段中间序列互补。以DNA合成仪固相亚磷酸三酯法合成并纯化。b.标记:按Riely等方法略有修改。以末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)催化Bio-11...
...作用区均存在于Taq酶中。Taq酶具有依赖DNA合成的5’→’3’外切酶活性,因此,模板上有一段退火的3’-磷酸化的“阻断物”,会被逐个切除而不会阻止来自上游引物链的延伸,而对于5’-32P标记的合成寡核苷酸引物,则无论是单链或是与模板复性...
.../μl。作者在英皇家研究生院Polak教授实验室应用于放射性标记cRNA探针的浓度为0.5ng/μl,而在非放射性标记(生物素或地高辛)cRNA探针浓度为2.5ng/μl,放射性标记DNA探针浓度为1.0ng/μl。向正华等应用地高辛标记...
...用第一套引物扩增15~30个循环,再用扩增DNA片段内设定的第二套引物扩增15~30个循环,这样可使待扩增序列得到高效扩增,而次级结构却很少扩增。用起始引物限量方法或Centricon30(Amicon)分子滤过器离心,在第二套引物加入前...
...之前必须对它的特异性,敏感性进行鉴定。鉴定举例,用阳性抗原片,脱蜡至水,胰蛋白酶消化,加第一抗体(多克隆或单克隆),一般过夜再加标记抗同一抗特异性抗体结合的胶体金溶液(多克隆或单克隆抗体标记的胶体金)详细方法步骤见后IgGS法,一般做1:2...
....标记液△:生物素标记时为10mmol/L的生物素-11-UTP※:为检测标记率而加。2.转录标记终止液(1)0.2mol/L EDTA:用于地高辛标记法(2)生物素标记终止液:(四)DNA探针标记常用试剂的配制(1)10 ×缺口平移缓冲液...
...从头合成DNA链,而必须有一个原有的多核苷酸链作为引物,DNA聚合酶只能在引物的3′末端上逐步合成DNA链。由此可见,DNA链的合成方向是从5′端至3′端进行的。无论在原核细胞或真核细胞中,均存在着多种DNA聚合酶,它们的性质不完全相同。目前...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。