...基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过 剪接 、去除了 内含子 的cDNA。 图20-9 cDNA文库的构建 三、 聚合酶链式反应 （PCR） 如果已经知道目的基因的序列，就能很方便地用PCR聚合酶链式反应，polymerase chain reaction，从基因组DNA或cDNA中获得目的基因，可不必要经过复杂的DNA文库构建过程。PCR是70年代...
...个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应（PCR）扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp，再用Sac-1酶切扩增产物，可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉粥样硬化 相关性。本节采用PCR-RFLP检测ApoCⅢ基因型。 一、仪器与试剂 1．仪器：电...
...动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。 【分类】 ● 1.纸电泳法 操作法 (1) 电泳 缓冲液 枸橼酸盐 缓冲液(pH3.0)。取 枸橼酸 (C6H8O7.H2O)39.04g与 枸橼酸钠 (C6H5Na3O7.2H2O4.12g，加水4000ml，使溶解。 (2) 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中...
...和0.1% SDS中,室温下洗涤15分钟(轻轻摇动),然后将滤膜移入0.1%×SSC和0.5%×SDS溶液中,68℃轻轻摇动保温2h，更换 缓冲液 后继续保温30min。 洗脱的温度一般应控制在Tm值12℃以下，［Tm=69.3+0.41×(G+C）%］，双链DNA的Tm值随错配 碱基对 数每增加1%而递减1℃。 6．结果显示。 放射性测定 方法，固相膜的 ...
...C和0.1% SDS中,室温下洗涤15分钟(轻轻摇动),然后将滤膜移入0.1%×SSC和0.5%×SDS溶液中,68℃轻轻摇动保温2h，更换缓冲液后继续保温30min。 洗脱的温度一般应控制在Tm值12℃以下，[Tm=69.3+0.41×(G+C）%]，双链DNA的Tm值随错配碱基对数每增加1%而递减1℃。 6．结果显示。放射性测定方法，固相膜的放射性杂交结...
...个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应（PCR）扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp，再用Sac-1酶切扩增产物，可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉粥样硬化 相关性。本节采用PCR-RFLP检测ApoCⅢ基因型。 一、仪器与试剂 1．仪器：电...
...个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应（PCR）扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp，再用Sac-1酶切扩增产物，可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉粥样硬化 相关性。本节采用PCR-RFLP检测ApoCⅢ基因型。 一、仪器与试剂 1．仪器：电...
...个内含子和四个外显子。目前对载脂蛋白CⅢ基因3'末端非编码区C-G对换产生一个Sac-Ⅰ酶切位点与 冠心病 的关系未有定论。用多聚酶链反应（PCR）扩增载脂蛋白CⅢ基因3'末端233bp，再用Sac-1酶切扩增产物，可以检测载脂蛋白CⅢ基因3'末端的突变及其与 动脉粥样硬化 相关性。本节采用PCR-RFLP检测ApoCⅢ基因型。 一、仪器与试剂 1．仪器：电...
标题 玻璃 酸酶测定法 附录序号 附录Ⅻ 内容全文 C. 玻璃酸酶测定法 试剂 (1) 醋酸－醋酸钾缓冲液 取醋酸钾14g与冰醋酸20.5ml,加水使成1000ml。 (2) 磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠2.5g、无水磷酸氢二钠1.0g与氯化钠8.2g，加水使成1000ml。 (3) 水解 明胶 取明胶50g，加水1000ml，在121℃加热90分钟，然后冷冻...
...脉粥样硬化有不同程度的关系。 一、分析ApoB基因多态性的方法 对ApoB基因多态性进行检测、分析的方法很多，如：限制性内切酶的酶谱分析法，PCR直接分析法，PCR产物RFLP分析法，等位基因特异性寡核苷酸（ASO）杂交法等等，其中最多用且简单的方法有PCR产物直接分析法和PCR产物RFLP分析法。 PCR产物直接分析法，是采用合适的引物，通过多次扩增，获得...
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