信号转导的结果是细胞核内一些转录因子同DNA上某些特定的序列结合，调节转录活性和基因的表达水平。因而分离鉴定细胞内核转录因子在信号转导研究中具有独特的意义。根据核转录因子可与一些特定的核甘酸序列结合的特点，将其特定的核苷序列标记上同位素，来鉴定信号转导中的核转录因子。核转录因子具有一些特征性的结构域，即亮氨酸拉链（lucine zipper）、锌指结构（zi...
脱氧核糖核酸 ( DNA )是生物界遗传的主要物质基础。 生物 有机体的遗传特征以密码(code)的形式编码在DNA 分子 上，表现为特定的 核苷酸 排列顺序-即 遗传信息 ，在 细胞 分裂前通过DNA的复制(Replication)，将遗传信息由 亲代 传递给 子代 ，在后代的 个体发育 过程中，遗传信息自DNA 转录 (Transcription)给 R...
质粒（plasmid）是许多种细菌中发现的染色体外的遗传因子，它是闭合环状的双链DNA分子，大小从1kb直到200kb以上。质粒所带的基因通常有利于宿主细胞。例如基因的产物是某些抗生素或对某些抗生素的抗性、能降解某些复杂的有机化合物、产生大肠杆菌素和肠毒素、产生限制酶或修饰酶等。 在天然条件下，许多种质粒是通过类似于细菌接合的过程传递给新的宿主。在实验室条件...
动脉血管壁胶原提取的基本方法是，首先除去凝血等其他杂质，由于胶原为杆状三螺旋结构，能耐受胃蛋白酶的作用，但是两端球蛋白结构能被胃蛋白酶水解。胶原纤维内分子间的共价交联是由分子末端赖氨酸或羟赖氨酸形成，用胃蛋白酶切断末端交联结构，使胶原分子的巨形结构被破坏，从完整分子可提出各种类型的胶原。 （一）胶原的初步分离 1．小心取出动脉血管，用0.05mol/L BP...
一、血管壁细胞提取 1．以无菌术取动脉，立即放入4℃、5%水解乳蛋白Hanks液中漂洗，除去凝血。 2．用小镊剔除外膜纤维、脂肪组织，用剪子沿血管壁纵向剪开血管，用Hanks液洗2次。 3．可先分开内皮细胞和平滑肌细胞，也可不区分两类细胞，将血管切成小块，放入2%胶原酶，温浴12～18h。 4．梯度液选择40%～70%，40%梯度液应是4份precoll、1...
胶体金制备完毕后须经电镜下质量鉴定才能应用。
动脉粥样硬化 病灶 主要涉及两类血管细胞即血管内皮细胞和中膜平滑肌细胞（SMC），本节主要就这两类细胞进行讨论，介绍一般培养和鉴定方法。 一、血管内皮细胞的培养方法和特性 人和动脉不同部位、不同血管如大动脉与小动脉、毛细血管，以及静脉血管之间存在差异，在处理这些细胞时应分别对待。血管内皮细胞形态较小，近似圆形，呈均匀排列，一般取材于人和动物的 脐带 。 1．...
(一)DNA复制的起始点 很多实验都证明：复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点(originof replication)常用ori或o表示。细胞中的DNA复制一经开始就会连续复制下去，直至完成细胞中全部基因组DNA的复制。DNA复制从起始点开始直到终点为止，每个这样的DNA单位称为复制子或复制单元(replicon)。在原核细胞中，...
...许多不足之处，近年来国内外已将HLA分型技术由抗原水平发展到基因水平。 （一）限制性片段长度多态性检测技术 这是首先建立的对多态性进行检测的DNA分析技术。个体间抗原特异性来自氨基酸顺序的差别，后者由编码基因的碱基顺序不同所决定。这种碱基顺序的差别造成限制性内切酶识位置及酶切位点数目的不同，从而产生数量和长度不一的DNA酶切片段。用特异性探针对整个基因组DN...
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